紫果西番莲叶抗焦虑活性成分的研究

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紫果西番莲(Passiflora.edulis Sims)是西番莲科(Passifloraceae)西番莲属(Passiflora L)植物,是我国栽种面积最广泛的一个品种,目前在我国南部的台湾、福建、广东、广西和云南等地都有栽培。在北美及欧洲,多种西番莲叶提取物已作药用,如抗氧化、抗焦虑、镇静、抗菌消炎、利尿、滋补等,在治疗酒精、尼古丁、吗啡以及大麻酚的药物成瘾性上也有很好的疗效。国外文献对西番莲属的另一个品种——粉果西番莲的化学成分及其药理作用都有详尽地报道,然而,对紫果西番莲的研究报道却很少。本课题对紫果西番莲叶抗焦虑活性进行了研究,目的是找出新的药源,并对寻找和筛选强活性药用成分及新药的研制提供理论依据。首先对紫果西番莲从草本考证、原植物形态、显微鉴别、理化鉴别等几个方面作了生药学鉴定。用60%乙醇以料液比1:15在温度为60℃时重复浸提紫果西番莲叶粉末,蒸发溶剂并真空干燥得紫果西番莲叶乙醇提取物。称取西番莲叶乙醇提取物用适量蒸馏水分散后,加入硅藻土并搅拌均匀,置入索式提取设备中,分别用不同极性的溶剂萃取,得到石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物。然后,用小鼠高架十字迷宫实验模型对四个相萃取物进行初步抗焦虑活性筛选,结果正丁醇萃取物抗焦虑活性明显。紫果西番莲叶乙醇提取物正丁醇部位,经过大型硅胶柱、反复小型硅胶柱层析对其进行纯化。应用理化性质、薄层色谱技术,参照中华人民共和国药典(2010版)的条件对过柱纯化后样品中含有的白杨素和异牡荆素作初步阳性判断。然后利用反相高效液相色谱等技术分析测定白杨素和异牡荆素。对样品的制备、流动相的选择和洗脱条件进行了多次试验探索,鉴定并测定出白杨素和异牡荆素含量分别为0.485%和0.087%。采用微波辅助萃取法对紫果西番莲叶总黄酮的提取方法进行优化。用乙醇-水为萃取溶剂,分别选取乙醇体积分数、辐射时间、料液比、微波功率等参数作为提取影响的因素,在单因素试验的基础上,选取提取工艺的因素和水平,采用Orthogonality Experiment Assistant II V3.1版软件进行正交试验设计和结果分析,取得最佳工艺参数为:乙醇浓度为60%,微波功率为350W,间歇萃取时间为9min,料液比为1:30,可得黄酮得率为3.4593%。
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