VDR与β-catenin、CyclinD1、C-myc在肺腺癌中的表达及临床病理意义

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目的:肺癌的发病率及病死率居全球恶性肿瘤的首位,在我国,其发病率也呈逐年上升的趋势,给社会及家庭带来了巨大负担。在治疗方面,外科手术、放射治疗和化疗方法已取得了进展,但肺癌长期生存率仍然很低,初始治疗后复发率非常高,因此需要我们更深入的研究其发生、发展的机制,找到更有效的防治手段。维生素D(Vit D)除了具有调节钙磷代谢的经典作用,目前研究已经证实了这种激素在癌症领域的作用,如Vit D与靶细胞中的维生素D受体(Vitamin D Receptor,VDR)结合后参与细胞生长调节,细胞凋亡和细胞分化以及抑制癌细胞侵袭,血管生成和转移等。已有研究显示,VDR在包括结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、食管癌、卵巢癌、及肺癌等多种肿瘤中出现表达异常的情况。而Wnt/β-连环蛋白信号转导途径的改变在结直肠癌、肺癌、肝癌、胃癌、子宫内膜癌、卵巢癌、前列腺癌、甲状腺癌、肾母细胞瘤中也显示出重要意义。Vit D的抗肿瘤效应可以通过抑制WNT/β-catenin信号通路实现,并已经在结直肠癌中得到证实。而肺腺癌作为肺癌最常见的病理类型,发病机理及治疗受到国内外学者的广泛关注。目前尚无关于VDR与WNT/β-catenin信号通路中β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期素D1蛋白(cyclin D1)、C-myc蛋白在人肺腺癌中表达的相关性分析。故本文采用免疫组织化学方法检测44例肺腺癌组织及对照组织内VDR与β-catenin、Cyclin D1、C-myc的表达情况,探讨他们在肺腺癌中的表达及临床病理意义。方法:1.采用免疫组织化学方法检测44例肺浸润腺癌组织,9例非典型增生/原位癌组织及24例正常肺组织中VDR的表达,分析VDR的表达水平与患者性别、年龄、T分期、淋巴结转移、M分期、病理类型、脉管侵袭、Ki67增殖指数及临床分期等临床病理因素的关系;采用免疫组织化学法检测44例肺腺癌组织及24例正常肺组织中β-catenin、Cyclin D1、C-myc的表达,分析这3项指标的表达水平与患者性别、年龄、T分期、淋巴结转移、M分期、脉管侵袭、Ki67增殖指数及临床分期等临床病理因素的关系;最后分析VDR、肺腺癌及WNT/β-catenin信号通路的相关性。2.统计分析使用SPSS21.0软件包进行,VDR、β-catenin、Cyclin D1、C-myc蛋白表达和临床病理特征的关系使用χ2检验或确切概率法;各蛋白表达相关性分析采用spearman法,P<0.05被认为差异有统计学意义。结果:一.对44例肺浸润腺癌组织,9例非典型增生/原位癌组织及24例正常肺组织中VDR的免疫组化表达结果进行分析:1.正常肺组织肺泡上皮的表达部位在胞浆和胞核,为弱阳性表达,其中弱阳性表达率为62.5%(15/24),阴性表达率为37.5%(9/24),并见支气管黏膜上皮为强阳性表达;非典型增生/原位癌组织的表达部位在胞浆,大部分为弱阳性表达,其中弱阳性表达率为77.78%(7/9),中度阳性表达率为11.11%(1/9),阴性表达率为11.11%(1/9);腺癌组织的表达部位主要在胞浆,偶见胞核表达,其中强阳性表达率为47.72%(21/44),中度阳性表达率为38.64%(17/44),弱阳性表达率为11.36%(5/44),阴性表达率为2.27%(1/44);肺腺癌组织、非典型增生/原位癌组织及正常肺组织三组之间VDR的表达具有显著差异性(P<0.05)。2.肺腺癌组织中不同病理类型VDR表达的强度不同,其中腺泡型强阳性表达率为25%(7/28),中度阳性表达率为60.7%(17/28),弱阳性表达率为14.3%(4/28),阴性表达率为0(0/28);乳头型强阳性表达率为50%(5/10),中度阳性表达率为30%(3/10),弱阳性表达率为10%(1/10),阴性表达率为10%(1/10);实性型强阳性表达率为63.16%(12/19),中度阳性表达率为31.58%(6/19),弱阳性表达率为5.26%(1/19),阴性表达率为0(0/19);微乳头型强阳性表达率为100%(8/8);4种不同类型肺腺癌VDR的表达具有显著差异性(P<0.05)。除此之外,VDR在脉管内癌栓及游离癌细胞巢中均为强阳性表达。3.VDR的异常表达与肺腺癌患者的淋巴结转移(P=0.003)、脉管侵袭(P=0.032)、临床分期(P=0.001)有关,与性别(P=0.104)、年龄(P=0.50)、T分期(P=0.54)、M分期(P=0.447)、Ki67(P=0.198)无关。二.对44例肺腺癌组织及24例正常肺组织中β-catenin的免疫组化表达结果进行分析:1.β-catenin在肺腺癌组织中的异常表达率为72.73%(32/44);在正常肺组织中的异常表达率为20.83%(5/24),具有显著差异性(χ2=14.8323,P=0.0001)。2.β-catenin的异常表达与肺腺癌患者的性别(P=0.419)、年龄(P=0.255)、T分期(P=0.164)、淋巴结转移(P=0.983)、M分期(P=0.107)、脉管侵袭(P=0.622)、Ki67(P=0.301)、临床分期(P=0.392)均无关。三.对44例肺腺癌组织及24例正常肺组织中Cyclin D1的免疫组化表达结果进行分析:1.Cyclin D1在肺腺癌组织中的表达部位是胞核,其中强阳性表达率为40.91%(18/44),中度阳性表达率为25%(11/44),弱阳性表达率为27.27%(12/44),阴性表达率为6.82%(3/44);在正常肺组织为阴性表达;具有显著差异性(P<0.05)。2.Cyclin D1的异常表达与肺腺癌患者的性别(P=0.742)、年龄(P=0.54)、T分期(P=0.483)、淋巴结转移(P=0.197)、M分期(P=0.658)、脉管侵袭(P=0.153)、Ki67(P=0.271)、临床分期(P=0.327)均无关。四.对44例肺腺癌组织及24例正常肺组织中C-myc的免疫组化表达结果进行分析:1.C-myc在肺腺癌组织中的表达部位是胞核和胞浆,其中强阳性表达率为6.82%(3/44),中度阳性表达率为6.82%(3/44),弱阳性表达率为38.64%(17/44),阴性表达率为47.73%(21/44);在正常肺组织为阴性表达;具有显著差异性(P<0.05)。2.C-myc的异常表达与肺腺癌患者的性别(P=0.058)、年龄(P=0.085)、T分期(P=0.34)、淋巴结转移(P=0.680)、M分期(P=0.678)、脉管侵袭(P=0.212)、Ki67(P=0.142)、临床分期(P=0.828)均无关。五.对44例肺腺癌组织中VDR与β-catenin、Cyclin D1、C-myc的表达进行相关性分析可知,各项指标间均没有相关性(P>0.05)。结论1.VDR在正常肺组织、非典型增生/原位癌及浸润腺癌的表达逐渐增强,提示VDR与肺腺癌的发生发展相关。VDR在不同类型肺腺癌差异表达,并随着侵袭性增加而增强,提示VDR与肺腺癌的侵袭和进展相关。VDR与肺腺癌患者淋巴结转移、脉管侵袭及临床分期有关,提示VDR与肺腺癌的转移及预后相关,可能成为新的治疗靶点。2.β-catenin蛋白,Cyclin D1、C-myc蛋白在肺腺癌组织内的异常表达明显增加,但他们与肺腺癌患者的临床病理因素均无关,提示它们参与了肺腺癌的发生,但与肿瘤的进展可能无关。3.VDR的异常表达与β-catenin及Cyclin D1、C-myc的表达不相关,提示VDR可能是通过调控wnt/β-catenin之外的信号通路发挥抗肿瘤的作用。
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