【摘 要】
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本文通过PCR扩增获得两个不含“copperbox”抗铜启动子的片段的产物,将它们分别克隆到载体质粒pUCD615的无启动子的报告基因lux前面的SmaI位点,首次成功地构建了PpcoAshort
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本文通过PCR扩增获得两个不含“copperbox”抗铜启动子的片段的产物,将它们分别克隆到载体质粒pUCD615的无启动子的报告基因lux前面的SmaI位点,首次成功地构建了PpcoAshort-lux和PpcoEshort-lux的重组质粒。采用生物荧光法研究了大肠杆菌抗铜启动子不同长度片断的特性,结果表明含有“copperbox”的片段可以作为启动子,而不含“copperbox”的片段则不具有启动子的功能,证明了“copperbox”对于抗铜启动子发挥正常功能的重要性。此外,发现启动子PpcoE是一个比启动子PpcoA明显强得多的启动子;首次发现了启动子PpcoE-lux对诱导物应答曲线中有两个峰的现象,并作了合理的分析和解释。Cd2+和Ag+不能作为诱导物,而Zn2+和Ni2+则可以作为诱导物,但它们的效果比Cu2+相差较远。
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