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加快猪精液冷冻保存技术的研究,对畜牧业的发展具有重大的意义。使用冷冻精液,可以提高公畜的利用率,加快育种进程,降低饲养管理成本。但是,目前由于猪精子冷冻-解冻后质量不高,受精率低,所以还未广泛推广。大量研究结果表明,在冷冻稀释液中添加抗氧化剂可以有效地保护猪精子结构和功能的完整性,提高精子冻后质量。本论文主要研究生物类黄酮、维生素C、多不饱和脂肪酸和维生素E四种抗氧化剂对猪精子的保护作用,并对其抗冷冻损害的机理进行初步探讨。本研究获得的主要结果如下:1、猪精液冷冻保存过程中,基础稀释液中添加生物类黄酮和维生素C均能有效提高猪精子冷冻-解冻后的质量。其中,分别添加0.8mg/mL生物类黄酮和6mg/mL维生素C效果最佳。为了研究二者配伍的效果,本研究还将0.8mg/mL和1.0mg/mL的生物类黄酮与4mg/mL和6mg/mL的维生素C进行组合,分析精子冷冻-解冻后的活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性。结果表明,当同时添加0.8mg/mL生物类黄酮和6mg/mL的维生素C时明显高于对照组(P<0.05)。2、大量研究表明,多不饱和脂肪酸和维生素E可以有效防止脂质过氧化,对细胞膜的结构和功能具有保护作用。本研究在基础稀释液中分别添加1%,2%,4%,6%的多不饱和脂肪酸和0.2mg/mL,0.4mg/mL,0.6mg/mL,0.8mg/mL的维生素E,研究其对精子冻后质量的影响。结果表明,添加4%的多不饱和脂肪酸和0.6mg/mL的维生素E与对照组相比差异显著(P<0.05)。为了进一步确定二者的配伍效果,将4%,6%的多不饱和脂肪酸和0.4mg/mL,0.6mg/mL的维生素E以不同的组合方式加入基础稀释液。发现联合添加4%多不饱和脂肪酸和0.6mg/mL维生素E,精子冻后质量明显优于对照组(P<0.05)。3、猪精子细胞内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)在冷冻的过程中呈现不断下降的趋势。平衡后,添加生物类黄酮、维生素C、多不饱和脂肪酸和维生素E组对精子内三种酶活性的影响与对照组相比,差异不显著(P>0.05);联合添加生物类黄酮和维生素C组,三种酶的冻后活性明显高于对照组(P<0.05)。解冻后,联合添加生物类黄酮、维生素C组以及维生素C组,三种酶活性下降幅度明显比对照组低(P<0.05)。单独添加四种抗氧化剂时,都可以显著提高SOD、CAT的活性(P<0.05),但是GSH-Px活性变化不明显。