背景Berger教授是世界上第一个提出IgA肾病(IgAN)的研究者。IgA肾病(IgAN),是以IgA沉积于肾小球系膜区为主要特点的原发性肾小球疾病,也是目前全球范围内的最常见的原发性肾小球疾病。约30%至40%的IgA肾病患者,在IgA肾病发病后的20到30年,病情发展进入到终末期肾脏病,需要进行血液透析或腹膜透析治疗。这无疑会给病人的家庭与社会带来沉重的负担。IgA肾病的诊断是以肾脏穿刺活检为金标准的,其病理学特征是多种多样的,例如肾小球系膜细胞增殖、肾小球系膜基质增多、间质纤维化以及肾小管萎缩等,这些都是由于肾小球系膜区的免疫复合物沉积引起的,其具体成分至今尚不清楚。大量研究已经证实,IgA肾病是一种免疫炎症介导的肾小球肾炎,但其具体的发病及进展机制目前尚未完全明确。人类的IgA分子主要分为2种,即IgAl分子和IgA2分子这2种亚型。其中IgAl分子是血液循环中的主要形式(约占总量的85%),也是IgA肾病患者的肾小球系膜区沉积的主要成分。目前,IgA肾病发病机制研究的主流学说-“四重打击学说”认为,IgA肾病患者外周循环中的IgA1分子复合物水平的异常是IgA肾病发病的始动环节,其中IgA循环免疫复合物是导致损伤的关键步骤。此外,许多的研究人员还证实了,可溶性的CD 89、纤维连接蛋白以及转谷氨酰胺酶可与IgA结合,参与IgA肾病的发病,但是大分子复合物的组分目前尚不完全清楚。既往的研究也表明,肾脏系膜区沉积的免疫复合物来源于外周循环,提示外周循环大分子复合物中存在重要的致病因子。近年来中国糖尿病的发病率逐年升高,已经成为困扰国民健康的重大难题之一。在欧美等发达国家中,糖尿病是导致终末期肾脏病的首位病因。临床上,IgA肾病合并糖尿病的患者并不罕见。但有关IgA肾病合并糖尿病患者的临床及病理表现特点及其与单纯IgA肾病患者预后方面的差异,目前尚未见到有关报道。并且,考虑到糖尿病的高发病率,糖尿病患者完全可以合并存在非糖尿病肾损伤。既往的研究报道,在糖尿病患者合并存在的非糖尿病肾损伤中,以原发性IgA肾病为最常见。在我国,IgA肾病合并糖尿病的患者并不罕见,但其与单纯IgA肾病患者在发病机制方面是否存在差异,相关报道十分有限,大部分的研究都是基于IgA肾病与糖尿病肾病之间的比较。因此,本研究主要为了分析IgA肾病合并糖尿病患者与单纯性IgA肾病患者两组之间的临床表现、病理改变及预后的异同点。以及从分子水平进一步的分析IgA肾病合并糖尿病的患者与单纯性IgA肾病患者血浆中的循环免疫复合物对于人肾小球系膜细胞的促增殖能力和促炎症因子的分泌能力的异同。目的本研究通过收集IgA肾病合并糖尿病患者与单纯性IgA肾病患者的临床、病理及预后资料,旨在分析IgA肾病合并糖尿病患者与单纯性IgA肾病患者的临床表现、病理改变及预后的异同点;以及通过观察IgA肾病合并糖尿病患者与单纯性IgA肾病患者血浆中的循环免疫复合物刺激人肾小球系膜细胞,从分子水平进一步分析IgA肾病合并糖尿病患者与单纯性IgA肾病患者的血浆中的循环免疫复合物对于人肾小球系膜细胞的促增殖能力和促炎症因子的分泌能力的异同。方法1、对象1.1收集从2015年1月至2017年1月在郑州大学第一附属医院肾脏内科就诊并经肾活体组织检查(肾活检)确诊的500例原发性IgA肾病患者的临床、病理及其预后的资料。1.2人肾小球系膜细胞系2、分组2.1收集从2015年1月至2017年1月在郑州大学第一附属医院肾内科就诊并经肾活检确诊的500例原发性IgA肾病患者的临床病理资料,按照是否合并糖尿病分组,其中IgA肾病合并糖尿病组患者25例,单纯IgA肾病组患者475例。2.2从2015年1月至2017年1月在郑州大学第一附属医院肾内科就诊并经肾活检确诊的原发性IgAN患者28例原发性IgAN患者,按照是否合并糖尿病分组,(其中8例合并糖尿病,20例单纯IgA肾病),以及从2017年2月至2018年2月在我院进行体检,年龄和性别匹配的7例健康志愿者被招募。3、方法3.1以下以500例IgA肾病患者为研究对象1、收集500例患者的临床资料、肾脏组织病理资料以及预后资料;2、比较单纯IgA肾病患者与IgA肾病合并糖尿病患者之间临床表现、肾脏组织病理以及预后的差异。3.2以下以人肾小球系膜细胞为研究对象1、按照2.2中的分组情况,进行血浆收集与循环免疫复合物浓度的测定的提取;2、人肾小球系膜细胞刺激实验:利用提取的血浆循环免疫复合物刺激人肾小球系膜细胞,按照单纯IgA肾病组、IgA肾病合并糖尿病组以及正常人组分为三组,观察三组血浆循环免疫复合物刺激人肾小球系膜细胞24小时后,细胞上清液中的IL-6、CXCL-1的表达变化,利用elisa试剂盒检测IL-6、CXCL-1的表达水平;观察三组血浆循环免疫复合物刺激人肾小球系膜细胞24小时后,系膜细胞的增殖能力,利用CCK8试剂盒检测三组系膜细胞的增殖能力。结果1、单纯IgA肾病患者与IgA肾病合并糖尿病患者临床表现的差异与单纯IgA肾病组相比,IgA肾病合并糖尿病组患者年龄较大[(46.36±13.49)比(34.00±13.80)岁,P﹤0.001],血三酰甘油较高[2.06(1.52,3.11)比1.51(1.01,2.25)mmol/L,P=0.012]。2、单纯IgA肾病患者与IgA肾病合并糖尿病患者病理表现的差异IgAN合并糖尿病组肾小球基底膜厚度显著高于单纯IgA肾病组[(384.33±61.20)比(346.72±52.65),P=0.044]。3、单纯IgA肾病患者与IgA肾病合并糖尿病患者预后情况的差异与单纯IgA肾病组比较,IgAN合并糖尿病组患者发生终点事件比例更高[25(9.33%)比4(57.14%)mmol/L,P﹤0.001],预后更差,(Log Rank检验,P=0.004)。4、血浆循环免疫复合物对人肾小球系膜细胞上清液中IL-6、CXCL-1表达水平的影响4.1与正常对照组相比,IgA肾病组免疫复合物促进系膜细胞分泌IL-6(IL-6:85.25±22.70 pg/ml vs 70.58±8.74 pg/ml,p=0.023);4.2与正常对照组相比,IgA肾病组免疫复合物促进系膜细胞分泌CXCL-1(CXCL-1:493.03±188.71 pg/ml vs 339.17±143.95 pg/ml,p=0.043);4.3与IgA肾病合并糖尿病组比,无显着性差异(P>0.05);4.4与正常对照组相比,IgA肾病合并糖尿病组IL-6水平显著升高(IL-6:84.3±14.82pg/ml vs 70.58±8.74pg/ml,p=0.047)。4.5与正常对照组相比,IgA肾病合并糖尿病组CXCL-1水平有上升趋势,但未达到统计学意义(CXCL-1:460.91±188.69 pg/ml vs 339.17±143.95 pg/ml,p=0.181)。5、血浆循环免疫复合物对人肾小球系膜细胞增殖能力的影响5.1与正常对照组相比,IgA肾病组血浆循环免疫复合物刺激人肾小球系膜细胞后,细胞增殖能力增强(1.08±0.18vs0.77±0.13,p<0.001);5.2与IgA肾病合并糖尿病组相比,IgA肾病组血浆循环免疫复合物刺激人肾小球系膜细胞后,细胞增殖能力增强(1.08±0.18vs0.85±0.14,p=0.002);5.3与正常对照组相比,IgA肾病合并糖尿病组患者血浆循环免疫复合物刺激人肾小球系膜细胞后,细胞增殖能力虽有上升趋势,但差异无统计学意义(0.85±0.14vs0.77±0.13,p=0.285)。结论1.IgA肾病合并糖尿病较单纯IgA肾病患者具有不同的临床、病理特点和预后,此类患者更需密切监测病情和积极治疗。2.IgA肾病合并糖尿病患者的血浆循环免疫复合物对促进系膜产生炎症因子的作用与单纯IgA肾病患者相似,但其作用能力较低。但促进系膜细胞增殖的能力较弱,提示糖尿病患者循环免疫复合物的成分可能存在差异。