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背景和目的胃癌（gastric cancer,GC）是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一。据世界卫生组织国际癌症研究机构最新统计数据公布,2020年全球新发胃癌的患者约108.9万例,居第5位（占全球5.6%）,死亡约76.9万例,位列第4（占全球7.7%）。而2020年中国胃癌的发病人数约为47.8万（占全球43.9%）,死亡人数约为37.3万（占全球48.6%）,其发病率、死亡率均居我国恶性肿瘤谱第4位,整体防控形势严峻。近年来随着手术、化疗、放疗、靶向治疗以及免疫治疗在GC上取得的进展,使得GC的诊疗稳步提升。然而由于我国内镜普及率低、GC的异质性及药物耐药性的存在使得GC患者的预后不尽如人意。因此,探索新的生物学靶点,尤其是挖掘出高敏感性、高特异性的生物学标志物,对于胃癌患者的个体化精准诊疗及疗效评估具有重要意义。近年来,随着表观遗传学在恶性肿瘤领域的深化研究,参与真核生物基因转录组调控的RNA甲基化修饰已成为该领域的研究热点。其中,N6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine,m6A）修饰尤其引人注目,作为m6A修饰过程中重要的调控因子之一的甲基转移酶样3（Methyltransferase-like 3,METTL3）被发现在肝癌、胰腺癌、卵巢癌、骨肉瘤、黑色素瘤等多种多系统恶性肿瘤中表达上调。与此同时,在人体中每天发生DNA损伤,由于染色体结构的致密性,阻碍DNA修复的顺利进行。表观遗传学研究发现,通过组蛋白的共价修饰和ATP依赖的染色质重塑可以改变染色质的结构推动修复完成。共济失调毛细血管扩张突变（Ataxia telangiectasia mutation,ATM）蛋白作为PI3Ks家族的重要成员之一,发挥催化组蛋白磷酸化作用,在DNA损伤修复功能失常中意义非凡,并且被发现在多种恶性肿瘤中表达下调。最新研究表明,在DNA双链断裂（Double-strand break,DSB）损伤时,METTL3被ATM磷酸化激活,磷酸化的METTL3定位于DNA损伤位点,通过METTL3-m6A-YTHDC1轴调节DNA-RNA杂交体在DSBs部位的积累,调控该DNA损伤的同源重组修复。但是,在GC中METTL3与ATM的互作关系及临床意义,目前尚不清楚。本研究通过收集GC患者的临床病理资料并对该部分患者的癌组织及配对癌旁正常组织进行METTL3和ATM蛋白表达水平的测定,研究GC组织中METTL3及ATM蛋白表达的相关性,探讨METTL3和ATM蛋白与GC患者不同临床病理特征及预后的关系。为GC患者的诊断及预后评估提供新的生物标志物,以期获得新的抗肿瘤药物靶点,为GC的诊断及个体化精准治疗助力。方法1.通过电脑查阅病例及电话随访,筛选并收集63例GC患者的一般临床资料。将纳入的GC患者的手术标本制作成组织芯片,采用免疫组织化学法,分别检测其癌组织、配对的癌旁正常组织中METTL3和ATM蛋白的表达情况。2.应用caseviewer 2.4软件对组织芯片的免疫组化结果进行判读,应用SPSS21.0软件对上述判读结果与临床资料之间进行分析,用?2检验分别比较METTL3和ATM在癌组织和癌旁正常组织中的表达差异;用?2检验验证METTL3和ATM蛋白表达情况与患者临床病理特征的关系;采用Spearman相关性分析探讨两者在GC组织表达之间的相关性;用Kaplan-Meier法分析METTL3、ATM蛋白表达与GC患者术后DFS之间的关系,行Log-rank检验;采用Cox比例风险模型进行单因素及多因素生存分析。P值为双向性检验,检验水准为0.05。结果1.在63对GC患者癌组织及其配对癌旁正常组织中,METTL3在GC组织中的阳性率为69.84%,配对癌旁正常组织中阳性率为26.98%,差异具有统计学意义（P=0.003）;ATM在胃癌组织中的阳性表达率为28.57%,明显低于配对癌旁正常组织的阳性表达率60.32%（P=0.001）。2.METTL3在肿瘤直径≥5cm的GC患者中阳性表达率（81.3%）明显高于直径﹤5cm部分患者（58.1%）,在原发病灶位于贲门部的GC患者中阳性率（81.8%）显著高于原发病灶位于胃窦及胃体部患者（56.7%）,在脉管癌栓阳性GC中的阳性表达率（80%）高于脉管癌栓阴性部分患者（44.4%）,在TNM分期为III-IV期GC患者中的阳性表达率（83.3%）明显高于I-II期GC患者（57.6%）,以上差异均具有统计学意义（P﹤0.05）;另外,METTL3在GC组织中的表达差异与性别、年龄、恶性肿瘤家族史、淋巴结转移、远处转移、浸润深度、分化程度、神经侵犯、Lauren分型和Her-2表达均无明显相关性（P﹥0.05）。有恶性肿瘤家族史的GC患者中ATM蛋白阳性表达率为47.1%,无恶性肿瘤家族史的患者中ATM阳性表达率为21.7%,二者之间的差异具有统计学意义（P﹤0.05）;原发病灶位于贲门的GC患者中ATM蛋白阳性表达率为42.4%,原发病灶位于胃窦及胃体部的GC患者中ATM阳性表达率为13.3%,二者之间的差异具有显著统计学意义（P﹤0.05）;此外,ATM在GC组织中的表达差异与患者性别、年龄、淋巴结转移、远处转移、浸润深度、病理分期、分化程度、肿瘤大小、神经侵犯、脉管癌栓、Lauren分型、Her-2表达均无统计学意义（P﹥0.05）。4.METTL3与ATM在胃癌组织中共同阳性表达率为22.22%（14/63）,共同阴性表达率为23.81%（15/63）,经Spearman相关性分析,结果显示二者在癌组织中的表达无显著相关性,其中相关系数r=0.109,P﹥0.05。5.单因素COX回归分析显示,淋巴结转移、TNM分期、有无脉管癌栓及METTL3蛋白表达均与GC患者的DFS具有相关性。多因素COX回归分析结果均提示P﹥0.05,差异无统计学意义。结论1.1.与配对的癌旁正常组织相比,METTL3蛋白在胃癌组织中高表达,而ATM蛋白在胃癌组织中低表达;2.胃癌组织中METTL3蛋白的高表达与较大的肿瘤直径、脉管癌栓阳性、更晚的分期以及原发病灶位于贲门部显著相关;ATM蛋白的表达与有无恶性肿瘤家族史、原发病灶部位有关;3.胃癌组织中METTL3与ATM蛋白表达之间无明显相关性;4.淋巴结转移、TNM分期、有无脉管癌栓及METTL3蛋白表达与GC患者的DFS相关,但均不是胃癌独立预后影响因素。