超细纳米纤维因其直径小、比表面积大、孔隙率大、孔径可调等优点,可通过共价结合、物理吸附等方式固载酶或其他生物活性分子,广泛应用于环境监测、食品安全、临床诊断等领域,具有检测灵敏度高、重复性好、响应速度快、结果稳定等特点。本论文选取聚苯乙烯作为基体材料,通过硝化及还原反应获得胺基化的聚苯乙烯；再利用静电纺丝技术制备出胺基化聚苯乙烯的超细纳米纤维；然后,以纳米纤维为基材,通过戊二醛接枝乙醇氧化酶；再通过乙醇氧化酶氧化乙醇产生的过氧化氢来使靛蓝褪色,达到检测乙醇的目的。聚苯乙烯经浓硝酸／浓硫酸硝化、氯化亚锡还原后获得胺基化聚苯乙烯,聚苯乙烯中有17%的苯环上接枝上了胺基。由静电纺丝制备的胺基聚苯乙烯纤维膜粒径约为400nm,形貌均一,表面胺基密度约为235nmol/g。通过共价法成功接枝上乙醇氧化酶,固定化酶的活力回收约为49%。固定化酶显示出较好的热稳定性、酸碱稳定性以及使用稳定性,在使用15次后仍具有原固定化酶60%左右的活力。将得到的固定化酶用靛蓝染色,利用乙醇氧化酶氧化乙醇时产生的过氧化氢使靛蓝褪色,根据固定化酶纤维膜褪色程度的可判断样品中乙醇浓度范围。根据纤维膜颜色随酒精浓度发生显著变化,获得了纤维膜颜色深度随酒精浓度定量变化的定量曲线,结果表明在酒精浓度从0变化到1.0mg/ml,蓝色基色值从151变化到1。依据目前酒驾和醉驾中血液酒精浓度分别为0.2mg/ml和0.8mg/ml的规定,分别将固定化酶纤维膜用于唾液和血液中酒精含量的检测,结果表明唾液中酒精浓度为0.2mg/ml时,蓝色基色值从151变化到84,酒精浓度为0.8mg/ml时,蓝色基色值从151变化到25,根据目测即可观察到显著变化。由此可见,制备的固定化酶纤维膜既可以方便、快捷、准确的定性检测样品中乙醇浓度,也可以用于精确定量分析样品中乙醇含量。此检测方法可以广泛应用于交警部门执法检查或驾驶员自我检测体内酒精浓度,对可能发生的酒后驾车行为起到提醒作用。该检测方法廉价、便捷、准确,具有很好的实用性。