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目的:急慢性皮肤创面在临床上占据非常高的比例,如糖尿病足溃疡、褥疮、癌性溃疡和术后伤口感染等,常规方案的治疗效果并不总是令人满意,慢性/不愈合的伤口不仅会增加医疗负担,对社会发展也会造成严重影响。国内外研究显示,低温等离子体(Cold atmospheric plasma,CAP)具有促进急慢性皮肤创面愈合的作用,但研究中使用的等离子体设备不同,治疗效果也存在着差异。本研究使用空气等离子体源的手持及台式等离子治疗仪器处理皮肤创面难治性细菌和大鼠正常皮肤、治疗浅二度大鼠创面以及常见皮肤疾病创面,从基础到临床探索CAP体外灭菌作用及治疗皮肤创面的安全性和临床有效性,以期为治疗常见皮肤创面提供一种新型有效的方法。方法:本研究使用医用CAP治疗仪体外照射金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、大肠杆菌(Escherichia coli)和鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)等四种皮肤创面难治性细菌,分别照射30 s、60 s、90 s、120 s、180 s后观察存活细菌数量变化。采用100%强度(1.8J)、80%强度(0.8 J)和60%强度(0.4 J)CAP分别对成年大鼠皮肤进行30/20/10/5min照射处理,观察处理后即刻、处理后24 h、处理后48 h皮肤反应。构建大鼠创伤(浅二度烫伤)模型,分别采用烧伤膏(阳性对照组)、低强度CAP、中等强度CAP和高强度CAP对烫伤创面进行处理,阳性对照组予以每天涂抹一次烧伤膏,CAP组予以每天一次3 min的CAP照射,处理后第1天、第3天、第5天、第10天、第15天进行创面愈合程度观察。筛选我科门诊及病房对于传统治疗方案效果不佳的皮肤创面患者(如慢性湿疹、钬激光治疗后创面、外伤、瘀积性皮炎等)进行CAP治疗,观察创面愈合变化及患者瘙痒、疼痛等主观症状改善,评估CAP促进不同类型皮肤创面愈合的有效性及安全性。结果:(1)CAP治疗仪对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓假单胞菌、鲍曼不动杆菌等四种细菌具有体外灭菌作用。培养24 h后,四种细菌初始菌量为6.0log10CFU/ml。随着CAP处理时间的延长,存活菌数逐渐减少。当处理时间为90 s,浸泡时间为30 min时,剩余存活菌数约为4.0log10 CFU/ml。当处理时间为180 s,浸泡时间为30 min时,除鲍曼不动杆菌外,几乎100%的细菌被杀灭。(2)不同强度CAP对大鼠背部正常皮肤进行不同时长照射处理结果显示:CAP强度为100%,照射时长为30 min、20 min时,大鼠实验部位皮损出现明显红斑或水肿;照射时长为10 min时,大鼠实验部位皮肤均出现红斑,程度较轻;照射时长为5 min时,大鼠实验部位皮肤短时间内(1h)出现轻微红斑,24 h及48 h后恢复正常。CAP强度为80%,照射时长为30 min时,大鼠实验部位皮肤出现红斑或水肿或两者兼具;照射时长为20 min时,大鼠实验部位皮肤部分出现水肿;照射时长为10min和5 min时,大鼠实验部位皮肤未出现明显异常。CAP强度为60%,照射时长为30 min时,大鼠实验部位皮肤在处理后1h内出现轻微红斑,24 h及48 h后红斑消失;照射时长为20/10/5 min时,实验部位皮肤未出现明显异常。(3)大鼠浅二度烫伤模型实验发现,随着治疗时间增加,CAP治疗组和烧伤膏组大鼠的创面逐渐愈合,烧伤膏组大鼠创面愈合是在第15天,而CAP治疗组则在第10天观察到大多数大鼠创面明显缩小,甚至痊愈,特别是在中强度和高强度大鼠上更为多见。相比较CAP治疗组与烧伤膏组之间的疗效无统计学差异,表明CAP治疗浅二度烫伤具有和烧伤膏相似的治疗效果。此外,无论是低强度、中等强度、高强度CAP治疗组,三组间创面愈合程度没有统计学差异。(4)从我科门诊及住院部招募31例难治性皮肤创面患者(坏疽性脓皮病2例,糖尿病足1例,淤积性皮炎3例,反向型银屑病2例,寻常型银屑病2例,湿疹5例,刺激性皮炎2例,外伤2例,激光后创面6例,皮肤肿瘤5例(其中1例是肿瘤术后创面),冷冻后创面1例)进行CAP治疗。经过2-24次CAP治疗,26例患者皮肤创面患者治愈或治疗效果显著,5例患者(1例为淤积性皮炎患者,1例为激光术后创面患者,另外3例均为湿疹患者)无好转。31例患者中,仅1例患者在治疗过程中出现瘙痒症状加重,其他患者治疗过程中均未见不良反应。结论:(1)CAP对皮肤创面难治性细菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓假单胞菌、鲍曼不动杆菌)具有体外灭菌作用。(2)低强度、短时间CAP照射大鼠正常皮肤不会出现红斑或水肿等反应,但高强度、长时间照射则会出现红斑、水肿反应,随着照射时间延长、强度提高,皮肤反应出现的严重程度及概率会增加。(3)CAP治疗浅二度烫伤具有和烧伤膏相似的治疗效果,且无论是低强度、中等强度、高强度CAP,创面愈合程度没有统计学差异。(4)CAP可以促进多种急慢性皮肤创面愈合,不良反应轻微,对缩短疗程和改变预后都产生出积极的影响。(5)CAP有望成为一种新的、经济的、安全的创面治疗方法。