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目的:探讨利用siRNA（small interferference RNA）抑制血管内皮生长因子（VEGF）基因表达对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。 方法:设计针对VEGF基因的小干扰RNA,合成DNA模板,体外转录siRNA,通过脂质体2000将合成的双链siRNA转染入MCF-7细胞,设置转染VEGF错义序列SCR组、脂质体组、空白对照组,siRNA各剂量组,用MTT比色法检测siRNA对MCF-7细胞增殖的影响。通过Hoechst33258染色观察MCF-7细胞的凋亡。用流式细胞术检测细胞周期的改变,RT-PCR检测VEGF mRNA及bcl-2 mRNA表达的变化,免疫细胞化学法检测VEGF蛋白的表达。 结果:所设计的两个靶位点siRNA均能有效抑制乳腺癌细胞的增殖,转染24h、48h后各组MCF-7细胞MTT代谢率的统计结果显示各浓度siRNA1、siRNA2与脂质体对照组的A值以及细胞增殖抑制率在各时间点均有显著性差异（P<0.01）,错义序列组(即siRNASCR组)、脂质体组与空白对照组在各时间点比较没有显著差异（P>0.05）,siRNA1、siRNA2随着浓度的升高,作用时间的延长,抑制效果增强;Hoechst33258染色观察转染siRNA 48h后,荧光显微镜下观察到细胞核染色质高度凝聚,并裂解成碎块,产生凋亡小体,流式细胞仪检测到siRNA作用的细胞G0/G1期（细胞静止期和DNA合成前期）比例升高,S期和G2/M期（DNA合成期与有丝分裂期）比例降低,错义序列组、脂质体组无此变化;转染24h后siRNA1和siRNA2组的RT-PCR结果显示其VEGF mRNA、bcl-2 mRNA表达均有效抑制;同时,对应的VEGF蛋白水平也显著降低,然而作为阴性对照的错义序列组siRNASCR则没有这种效应,不起作用。 结论:体外转录合成的双链siRNA有效抑制乳腺癌细胞MCF-7 VEGF基因的表达,抑制肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞的凋亡,为肿瘤的基因治疗提供了新思路。本文应用所设计的针对VEGF基因的两组siRNA,转染在体外培养状态下的人乳腺癌细胞系MCF-7,结果显示抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡,改变细胞周期,VEGFmRNA、bcl-2 mRNA水平及蛋白表达水平均明显降低,从而得出在细胞水平上RNAi可成功应用于肿瘤的基因治疗的结论,为其临床应用提供理论基础。同时提示我们在乳腺癌的抗血管生成基因治疗中VEGF可以成为有效的靶位点。应用靶向VEGF基因的RNA干扰技术可以有效发挥抗肿瘤效应,为肿瘤的基因治疗提供了新思路。siRNA能够成功应用于体外培养的乳腺癌细胞系作为基因治疗肿瘤的临床前试验,极有可能成为未来肿瘤基因治疗的生物类新兴药物。