大黄素((Emodin)是从蓼科植物大黄、虎杖等中分离出来的主要有效单体,是一种橙黄色长针状结晶,熔点256℃~257℃,几乎不溶于水,溶于乙醇及碱溶液。大黄素具有抗菌、利尿、抗炎、利胆、止咳、降压促进胃肠蠕动、扩张血管等作用。近年来,临床上大黄素主要用于治疗胰腺癌、乳腺癌和肺癌,疗效显著。因此,大黄素作为抗肿瘤药物或者作为抑制肿瘤细胞生长药物的辅助剂,有非常广阔的应用前景。然而,大黄素的亲水性以及亲脂性都比较差,导致其在水中溶解度低,不利于注射给药,其在家兔体内药动学差异大,口服给药吸收速率和吸收度都很低,进入机体体后会出现突释现象,及大地限制了其临床应用。研究发现,两种或两种以上表面活性剂形成混合胶束体系后,能够显著提高所负载药物在水溶液中的溶解度和溶出速率。因此,为了解决大黄素在水中难溶和溶出慢的问题,本课题拟制备大黄素口服混合胶束,以改善大黄素的溶解性,提高溶出速率、增加吸收程度,从而改善其生物利用度。本课题选用吐温80、泊洛沙姆407两种载体材料制备包载大黄素的混合胶束,并对制得的大黄素口服混合胶束体系进行了理化性质的表征、体内外生物活性评价及在小鼠体内组织分布的研究。1.建立了测定外大黄素的高效液相色谱法,并对方法进行了专属性、线性、精密度、稳定性、回收率的考察。结果表明,在5.0~70μg/mL的浓度范围内,大黄素浓度与峰面积线性关系良好(A=48.004c-168.51,R~2=0.9999),日内与日间精密度<2%,回收率在96.43%?99.53%之间,大黄素溶液在20 h内保持稳定。同时,利用该方法测定了大黄素的表观油水分配系数,其在不同pH的磷酸盐缓冲液中均小于0.4。2.采用直接溶解法制备大黄素口服混合胶束,对多种材料组合进行了考察,当吐温80与泊洛沙姆407合用时,可形成透明稳定的胶束。并用荧光光谱法、紫外-可见分光光度法研究了吐温80、泊洛沙姆407与大黄素的相互作用。结果表明吐温80、泊洛沙姆407通过与大黄素形成基态配合物来淬灭其荧光。3.大黄素口服混合胶束的制备工艺及处方优化。通过单因素试验考察,以载药量、包封率为指标,对胶束载药量和包封率有明显影响的因素有:吐温80(mg)、泊洛沙姆407(mg)、投药量(mg)和水化体积(mL)。进一步用中心组合-效应面法实验优化得到的最优处方为:吐温-80的量为300 mg,泊洛沙姆407的量为3.93 mg,大黄素量为0.72 mg,水化体积为3.69 mL,按该比例制得胶束的包封率和载油量分别为96.92%、0.23%。4.大黄素口服混合胶束理化性质的表征。结果表明,胶束的平均粒径为7.264nm,PDI值为0.468,Zeta电位为-7.12mV,分布于口服吸收的最佳粒径范围内;透射电镜下胶束呈类球形,大小均一无黏连;混合胶束的CMC为1.26 mg/mL;DSC、TGA、XRD、IR结果显示胶束中大黄素的晶型结构消失,说明己被包载于胶束内核中。在人工胃液和人工肠液进行的体外释放实验显示:大黄素-丙二醇组在6 h达到释药平衡,而胶束组在12 h达到释药平衡。后者突释明显减少,缓释作用增强。5.大黄素口服混合胶束的药动学研究。以Wistar大鼠为模型,考察大黄素口服混合胶束与大黄素混悬溶液的药动学。结果显示,大黄素口服混合胶束大鼠体内的消除过程符合二室模型,血药浓度较高且达峰快,其半衰期较大黄素混悬溶液延长了6.5倍。表明以混合胶束形式给药大黄素在血浆中的滞留时间较长,能显著提高药物生物利用度并能更好地发挥药物的治疗效果。6.大黄素混合胶束在小鼠体内组织分布的研究。结果表明,胶束在肝中的浓度在8h时达到最高值,且在肝中的分布比大黄素混悬液增加了2.4倍,表明胶束易分布于肝和脾,而大黄素在心、肺、肾中的分布量差异很小,量也低,可降低其心、肺与肾毒性。7.超滤法-HPLC研究大黄素与大鼠血浆蛋白、牛血清白蛋白的结合率。结果显示,大黄素与大鼠血浆蛋白、牛血清白蛋白的结合率分别为94.0%、85.3%;大黄素与牛血清白蛋白的结合常数K为5.51×10~4 L/mol,结合位点n为0.05;由分子模拟可知,大黄素与BSA的作用力主要是疏水和氢键作用,兼有离子相互作用存在。