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背景随着经济的飞速发展,胰腺癌的发病率呈逐年上升趋势。目前,胰腺癌位居肿瘤死因第4位,由于起病隐匿,侵袭性强,又缺乏有效的早期诊断方法,确诊时往往已属晚期,诊断后中位生存期不到6个月,其5年生存率仅1%~5%,是预后最差的肿瘤之一。传统的手术治疗、放疗、化疗等治疗方法存在各自的局限性。近年来,随着分子生物学研究的飞速发展,细胞生长、分化、凋亡的机制逐渐被认识,研究发现多细胞生物通过细胞增殖与凋亡(Apoptosis)来维持自身稳定,如若两者失衡,则可能导致肿瘤的发生。通过诱导细胞凋亡来治疗肿瘤是可以考虑的,将成为治疗肿瘤的一个新途径。国外新近报道的一种小分子蛋白——来自鸡贫血病毒的凋亡素(Apoptin)具有潜在的应用价值。凋亡素与其它凋亡相关蛋白不同的是,它能够选择性地诱导肿瘤细胞和转化细胞凋亡而不杀伤人和鼠的正常二倍体细胞,且无毒副作用[1],因此可作为候选抗肿瘤制剂,具有很好的应用前景。目的观察pEGFP-Apoptin基因转入人胰腺癌细胞株PANC-1后,EGFP-A poptin融合蛋白在PANC-1细胞中的分布和亚细胞定位,以及EGFP-A poptin融合蛋白对肿瘤细胞的诱导凋亡效应,探讨Apoptin在体外诱导肿瘤细胞凋亡的机制。研究方法利用脂质体转染技术将构建的EGFP-Apoptin融合蛋白真核表达载体导入人胰腺癌细胞株PANC-1中,在荧光显微镜、激光共聚焦显微镜下观察EGFP-Apoptin融合蛋白在肿瘤细胞中的分布、亚细胞定位;用AnnexinⅤ-APC/PI双染法检测其在体外诱导肿瘤细胞凋亡的效应。结果pEGFP-Apoptin被成功转染入胰腺癌细胞株PANC-1,并可见其EGFP-Apoptin融合蛋白在细胞核中表达。EGFP-Apoptin组细胞在各检测时间点凋亡率明显高于空白对照组、C2组和Lipo组。结论EGFP-Apoptin融合蛋白在胰腺癌细胞株PANC-1中具有核定位效应,可以作为研究Apoptin在肿瘤细胞中分布和亚细胞定位的有效工具。EGFP-Apoptin融合蛋白在体外能早期、高效诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡。