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研究表明,许多天然成分的黄酮类化合物具有抗氧化、抗光敏和抗炎性损伤等作用,可以清除皮肤中的自由基,避免其对皮肤细胞的损伤作用。UVB(中波紫外线)是引起紫外线辐射导致皮肤损伤最主要的原因。UVB辐射导致人体皮肤的光损伤与活性氧簇(ROS)造成的氧化应激有关,ROS一方面致使线粒体损伤凋亡和DNA突变等促使一些炎症因子的释放,另一方面或直接导致了皮肤发生红斑、水疱等晒伤反应。皮肤光损伤是人们普遍关注的热点问题,对它的防治进行研究十分有必要,研发天然有效的抗氧化剂,对于延缓皮肤衰老以及预防紫外线辐射导致的皮肤光损伤有重要意义。枸杞叶有极高营养价值与药用价值,其中含有大量总黄酮,枸杞叶总黄酮作为一种天然来源的黄酮类化合物,将其外用于皮肤表面,是否能对预防由紫外线引起的皮肤光损伤起作用,目前国内外鲜有报道。目的:1.建立无毛小鼠急性紫外损伤模型。2.观察脱毛小鼠外用枸杞叶总黄酮乳膏后,UVB辐射对皮肤外观、皮肤最小红斑量(MED)、皮肤组织结构、皮肤超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(Hyp)的含量的影响。方法:1.采用研和法制备水包油型枸杞叶总黄酮乳膏制剂。2.用6%Na2S脱毛,恢复2天后,UVB照射小鼠背部脱毛区域的皮肤,以照射时间和小鼠背部皮肤变化为基准,确定小鼠急性紫外损伤模型。3.将脱毛后小鼠随机分成6组,除空白对照组外,其余组进行UVB照射2h/天,连续照射两周造成皮肤紫外损伤模型,紫外模型组直接照射UVB,基质组照射前涂抹等剂量乳膏基质,给药组照射前分别在裸露背部皮肤处外用低、中、高剂量的枸杞总黄酮乳膏。4.每隔2天照射前称量小鼠体重,每天观察小鼠背部皮肤变化,第14天根据评分标准进行评分,分别在第1天和第14天UVB照射前,测定MED。5.第14天照射结束后立刻处死小鼠,取背部辐照区皮肤,制片后进行HE染色,光镜下观察小鼠皮肤组织形态学的改变;采用紫外分光光度法测定皮肤组织中超SOD、GSH-Px和CAT活性以及MDA和羟脯氨酸Hyp的含量。结果:1.小鼠体重变化:紫外照射后,紫外模型组小鼠体重增长缓慢,差异不显著。2.小鼠背部皮肤外观变化:紫外模型组与空白组相比,小鼠背部照射区域皮肤外观评分明显增高(P<0.01),与基质组相比,评分则无明显变化(P>0.05);枸杞叶总黄酮高剂量组与紫外模型组相比,评分明显降低(P<0.01)。3.小鼠背部皮肤最小红斑量(MED):紫外模型组与空白组相比,最小红斑量无明显变化(P>0.05)外用枸杞叶总黄酮乳膏14天后,可见小鼠背部皮肤最小红斑量与模型组相比较,均明显增多(P<0.01),且高剂量组SPF=20。4.小鼠皮肤病理切片HE染色后,光镜观察发现模型组病理切片呈现光老化状态,有炎症反应;与模型组比较,枸杞叶总黄酮高剂量组皮肤组织病理切片可见光损伤程度减轻。5.小鼠皮肤组织中生化指标测定结果:与空白组相比,模型组小鼠背部皮肤组织MDA含量增高,Hyp含量降低,SOD、GSH-Px和CAT活性明显降低(P<0.01);与模型组比较,外用高剂量枸杞叶总黄酮乳膏可以显著降低小鼠背部皮肤组织中MDA含量,增高Hyp含量,提高SOD、GSH-Px和CAT活性(P<0.01)。结论:外用枸杞叶总黄酮可防止UVB辐照导致的皮肤损伤,其原因可能是通过提高皮肤组织内SOD、GSH-Px和CAT的活性,从而有效地清除皮肤组织自由基,使得皮肤自身抵抗紫外线的能力增强。