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Gankyrin是一个近年来新发现的原癌基因。它所编码的蛋白质由226个氨基酸组成,包含7个锚蛋白（ankyrin）重复序列,是26S蛋白酶体的一个组份。Gankyrin能与Rb、p53、MDM2、RhoGDI等多个信号通路中的重要分子相互作用,在细胞转化、凋亡以及周期调控等多种生物学事件中发挥重要作用。目前已发表的文献显示了Gankyrin与肝癌、肺癌、胰腺癌、食道癌以及结肠癌等的相关性,其中对参与肝癌发生发展转移的具体机制研究的较为深入,而对其影响结肠癌发生发展的分子机制研究尚未见报道。我们新近对100例结肠癌及其邻近正常组织切片的病理分析结果表明Gankyrin在结肠癌组织中高表达,提示Gankyrin在结肠癌的发生发展中发挥重要作用。本项研究中我们通过同源重组基因打靶技术建立了完全敲除Gankyrin基因的人结肠癌细胞, HCT116 gankyrin-/-,从而获得了Gankyrin功能研究的重要工具细胞。在该细胞模型中我们发现敲除Gankyrin后HCT116细胞的转化、成瘤能力明显减弱;细胞生长变缓,周期同步化实验结果表明敲除细胞出现G1-S期进程延迟和G2/M期阻滞;此外,敲除Gankyrin后HCT116细胞的迁移能力减弱,相反稳定过表达Gankyrin的NIH3T3细胞迁移能力显著增强。为了进一步寻找相关的分子机制线索,我们对HCT116, HCT116 gankyrin-/-两种细胞进行了差异蛋白质组学分析,发现了17个表达水平受Gankyrin调控的蛋白质。其中包括蛋白质泛素化降解系统相关蛋白质UBE2T、蛋白质Neddylation所需的E2酶Ubc12、细胞周期相关蛋白质Spc25、p53相关分子PIG3以及细胞骨架蛋白调节分子Lasp1等。本研究加深了对细胞内Gankyrin调控网络的认识,为进一步明确Gankyrin在泛素蛋白酶体系统中的功能,阐明Gankyrin在结肠癌进程中的作用以及揭示结肠癌发生发展转移的分子机制提供了新的线索。