论文部分内容阅读
背景和目的 DCs作为一种专职抗原递呈细胞，具有独特的免疫学功能，而该功能取决于DCs的免疫状态，尤其是其成熟分化的程度及主要组织相容性抗原复合物-Ⅱ（MHC-Ⅱ）和分子B7分子等免疫分子的表达状况。一般认为肿瘤相关抗原（TAA）只有在MHC-Ⅱ的限制下才又可能激活T1淋巴细胞，从而启动宿主免疫系统，产生特异抗肿瘤免疫反应。而这一过程必须在B7等第二信号分子的辅助下才能顺利完成。DCs表面MHC-Ⅱ及B7分子表达低下或缺失将导致DCs免疫功能低下或免疫无能。我们拟通过分离食管癌患者和正常人外周血中单个核细胞（PBMNC），在GM-CSF和IL-4细胞因子的刺激下，培养7天收集DCs并检测其表面CD83、CD80（B7-1）、CD86（B7-2）等分子的表达。 材料和方法 食管癌患者及与之匹配健康人各5例，各取外周静脉血20ml，采用Thomas法，分离及培养DCs。培养过程中，倒置相差显微镜观察细胞形态变化。培养7天后，收集DCs，透射电镜观察DCs形态，采用流式细胞仪检测DCs表面CD83、CD80、CD86等分子的表达。用液闪计数仪观察DCs对T细胞的增殖作用。 结果 在细胞因子的刺激下，培养7天后通过倒置相差显微镜和透射电镜可以见到典型的DCs形态。与正常对照组相比，由食管癌患者外周血培养而来的DCs表达较低的CD80（41 .7肚7.35 VS6 1 .41士7.47，P<O，05）和CD86（29.68士7.32 VS 37.28场.75，P<0.05），但是反映DCs成熟状态的CD83分子在两组中没有统计学差别 （4.44士1 .17 VS 5.18士1.59，外0.05）;其诱导T细胞增殖能力每分钟液闪计数cPm为1000肚2000，明显低于正常人组（cPm为20000士3000），P<0.01。 结论1.本研究发现，在细胞因子GM一CSF和IL一4联合诱导下，食管癌患者外周血DCs表面CD80、CD86分子的表达水平明显低于正常人水平，其刺激T细胞增殖能力亦低于正常人。2.无论是食管癌患者，还是正常人，经GM一CSF和IL一4联合诱导后，都极少表达反映成熟、有活性DCs标记物CD83，表明通过此法获得的是处于未成熟状态的DCs。