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金属硫蛋白是一类富含半胱氨酸、无芳香族氨基酸的低分子量蛋白，可分为四种亚型MT-Ⅲ、MT-Ⅱ、MT-Ⅲ、MT-Ⅳ，每分子MT可以结合7分子的Zn3+或Cd2+。对金属离子与自由基具有很高亲和力的特性使得MT在对金属离子特别是Zn2+的代谢、运输以及自由基的清除过程中发挥着重要作用，因此在商业和医学领域有着广泛的应用，但传统制备方法效率低、成本高的局限性限制了MT的大规模应用，因此我们借助乳腺生物反应器技术以解决这种问题。
首先，利用牛αs1酪蛋白的两侧序列-1660-1437，15628-19476作为MT的调控元件，1.3kb鸡溶菌酶基因5’侧翼序列和2个拷贝的鸡β珠蛋白绝缘子作为去除位置效应的原件，三者通过组合得到三种结构的表达载体pIMC-MT、pIC-MT、pMC-MT。
其次，采用限制性内切酶切割三个表达载体，并将得到的包含结构元件的片段通过原核显微注射技术获得转基因鼠，在F0代鼠中经PCR和SouthernBlot鉴定pIMC-MT共有7只阳性鼠(公鼠3、14、16、20,母鼠22、24、29)，pIC-MT共有7只阳性鼠(公鼠2、7、8、10、13，母鼠21、27)，pMC-MT共有阳性鼠3只(公鼠6、12，母鼠20)。由于母鼠少，所以对阳性鼠传代以扩大阳性母鼠数量。经PCR鉴定F1代鼠中pIMC-MT共8只阳性母鼠(8、10、11、20、22、23、36、44)，pIC-MT共3只阳性母鼠(6、10、28)，pMC-MT共1只阳性母鼠(25)。
最后，对F0代和F1代母鼠分别采集乳汁，并对F1代采集乳腺组织进行Western blot、RT-PCR及Real-timePCR鉴定。在蛋白水平上所有转基因鼠均未检测到MT的表达，只在RNA水平上检测到F1代小鼠中MT的表达，pIMC-MT转基因鼠中只有11号有表达，pIC-MT及pMC-MT转基因鼠中全部有表达。与GAPDH相比，GAPDH的表达量分别是pIMC-MT-F1-11的17.87、pIC-MT-F1-6的2.25、pIC-MT-F1-10的4.92、pIC-MT-F1-28的14.32倍，唯独pMC-MT-F1-25的倍数为GAPDH的14.93。