在培养液中添加各种生长因子常被用于优化哺乳动物卵母细胞体外受精培养体系。研究表明,血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF)支持动物配子的发生、生长和发育,对动物卵母细胞体外受精有积极影响。本研究探讨了VEGF对水牛卵母细胞体外成熟、受精和早期胚胎发育的影响,旨在优化水牛卵母细胞体外受精培养体系,进一步提高水牛体外胚胎生产效率。本研究包括三个试验。试验一,检验卵丘细胞对水牛卵母细胞体外受精的影响,研究胞质轻微变形的受精卵的发育潜能,并初步试验VEGF对水牛配子发育潜能的影响。结果发现：(1)卵丘细胞去除组受精卵的卵裂率和囊胚率极显著高于保留组(55.14%、20.38%vs.21.44%、3.68%,P<0.01)；(2)细胞质轻微变形的受精卵卵裂率和囊胚率略高于细胞质形态正常组,但差异均不显著(59.96%、20.13%vs.48.59%、18.86%,P>0.05)；(3)卵母细胞成熟培养液中添加10ng/mL VEGF时,受精卵的卵裂率显著高于对照组(0ng/mL VEGF)(54.36%vs.41.84%, P<0.05);受精液中添加10ng/mL VEGF时,受精卵的卵裂率极显著高于对照组(64.28%vs.43.40%,P<0.01)。以上结果表明：(1)水牛成熟卵母细胞去除卵丘细胞的体外受精效果较好；(2)细胞质轻微变形的受精卵仍具有较好的发育潜能；(3)VEGF能提高水牛卵母细胞的发育潜能和精子的受精能力。试验二,探讨不同浓度的VEGF (0、1、10、100ng/mL)对水牛卵母细胞体外成熟的影响。结果发现：(1)各处理组卵丘扩展指数均高于对照组,但各组间差异不显著(2.83、2.68、2.65vs.2.61, P>0.05);(2)10ng/mL VEGF处理组的成熟率显著高于对照组(72.30%vs.57.30%,P<0.05)；1ng/mL和100ng/mL组的成熟率也高于对照组,但差异不显著(67.18%、60.58%vs.57.30%,P>0.05)；(3)各处理组的卵裂率均高于对照组,其中10ng/mL组卵裂率显著高于1ng/mL组和对照组(53.27%vs.41.60%、40.97%,P<0.05)。以上结果表明：(1)VEGF对水牛卵母细胞体外成熟有积极影响；(2)VEGF不仅能促进水牛卵母细胞的核成熟,还能提高卵母细胞的发育潜能。试验三,探讨在受精液中添加不同浓度的VEGF(0、1、10、100ng/mL)对水牛精子受精能力的影响。结果显示,10ng/mL和100ng/mL VEGF处理组的卵裂率均极显著高于对照组(63.04%、56.26%vs.41.92%,P<0.01),1ng/mL组的卵裂率也显著高于对照组(55.16%vs.41.92%,P<0.05)；10ng/mL组的囊胚率显著高于对照组(32.62%vs.17.00%,P<0.05)。在前期研究结果的基础上,同时在成熟培养液和受精液中添加10ng/mL VEGF,研究其对水牛卵母细胞体外受精胚胎发育的影响,处理组的卵裂率和囊胚率均极显著高于对照组(64.28%、27.22%vs.43.40%、19.02%,P<0.01),且处理组的囊胚细胞数显著高于对照组(106.83vs.89.50,P<0.05)。以上结果表明,VEGF能促进水牛卵母细胞体外受精和早期胚胎发育,并且能提高胚胎质量。总之,VEGF对水牛体外胚胎生产有积极影响,可用于优化水牛体外受精培养体系。本研究中,以添加10ng/mL VEGF对水牛卵母细胞体外成熟和受精的促进效果最好。