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实验目的探讨拉莫三嗪(Lamotrizine,LTG)对APP/PS1双转基因小鼠脑内慢性炎性反应的作用,并进一步探讨其可能的作用机制,为临床药物治疗阿尔茨海默病提供宝贵参考数据,也为LTG治疗阿尔茨海默病的临床应用及产业化进程提供重要的理论支持和实验依据。实验方法取20只4月龄雄性APP/PS1双转基因阳性小鼠(TG),分成处理模型组(TG+LTG)10只,模型组(TG)10只;取20只4月龄雄性野生对照小鼠(WT),分成处理对照组(WT+LTG)10只,空白对照组(WT)10只。对两组给药处理小鼠予以拉莫三嗪(30mg/kg.d)给药处理,连续给药3个月后,提取大脑蛋白。应用ELISA检测各组小鼠脑内炎性因子IL-1β、IL-10、TNF-α、TGF-β的表达水平;应用Western Blot检测各组小鼠脑内钠离子通道蛋白Nav1.1、Nav1.2、Nav1.6的表达水平;应用Western Blot检测各组小鼠脑内信号通路蛋白p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-GSK-3β/GSK-3β的表达水平。实验结果1.拉莫三嗪可以上调APP/PS1双转基因小鼠脑内的抗炎因子表达水平,下调促炎因子表达水平相对于野生对照小鼠(WT),APP/PS1双转基因小鼠(TG)脑内促炎因子IL-1β和TNF-α表达水平显著升高(P<0.001,P<0.001),而经拉莫三嗪处理后明显下降(P<0.05,P<0.05);相对于野生对照小鼠(WT),APP/PS1双转基因小鼠(TG)脑内抗炎因子IL-10和TGF-β表达水平显著降低(P<0.001,P<0.05),而经拉莫三嗪处理后明显升高(P<0.05,P<0.05)。拉莫三嗪对野生对照小鼠(WT)脑内炎症因子IL-1β、IL-10、TNF-α、TGF-β表达水平无明显影响(P>0.05)。2.拉莫三嗪可以降低APP/PS1双转基因小鼠脑内Nav1.6蛋白表达水平APP/PS1双转基因小鼠(TG)脑内Nav1.6蛋白的相对表达强度水平较野生对照小鼠(WT)显著升高(P<0.001),而经拉莫三嗪处理后明显降低(P<0.01)。拉莫三嗪对野生对照小鼠(WT)脑内Nav1.6蛋白的相对表达强度水平无明显影响(P>0.05)。拉莫三嗪对APP/PS1双转基因小鼠(TG)脑内Nav1.1、Nav1.2蛋白的相对表达强度水平无明显影响(F=1.468,P=0.295;F=1.383,P=0.316)。3.拉莫三嗪可以提高APP/PS1双转基因小鼠脑内PI3K、AKT、GSK-3β的表达水平拉莫三嗪处理后可以提高APP/PS1双转基因小鼠脑内PI3K蛋白的相对表达强度水平(P<0.01),而拉莫三嗪对野生对照小鼠(WT)脑内PI3K蛋白的相对表达强度水平无明显影响(P>0.05);APP/PS1双转基因小鼠(TG)脑内AKT蛋白的相对表达强度水平较野生对照小鼠(WT)显著降低(P<0.001),而经拉莫三嗪处理后升高(P<0.05)。拉莫三嗪对野生对照小鼠(WT)脑内AKT蛋白的相对表达强度水平无明显影响(P>0.05);拉莫三嗪处理后可以提高APP/PS1双转基因小鼠脑内GSK-3β蛋白的相对表达强度水平(P<0.01),而拉莫三嗪对野生对照小鼠(WT)脑内GSK-3β蛋白的相对表达强度水平无明显影响(P>0.05)。4.拉莫三嗪可以提高APP/PS1双转基因小鼠脑内p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β的表达水平APP/PS1双转基因小鼠(TG)脑内p-PI3K蛋白的相对表达强度水平较野生对照小鼠(WT)升高(P<0.01),而经拉莫三嗪处理后升高(P<0.05);相对于野生对照小鼠(WT),APP/PS1双转基因小鼠(TG)脑内p-AKT表达水平明显下降(P<0.001),而经拉莫三嗪处理后明显上升((P<0.05);相对于野生对照小鼠(WT),APP/PS1双转基因小鼠(TG)脑内p-GSK-3β表达水平明显下降(P<0.001),而经拉莫三嗪处理后明显上升(P<0.01)。结论拉莫三嗪可能通过激活PI3K/AKT/GSK-3β信号通路减少Nav1.6蛋白的表达,从而减轻APP/PS1双转基因小鼠脑内慢性炎性反应。