目的与意义：采用异基因小鼠(C₅₇BL／6j，H-2K^b、BALB／c，H-2K^d)和同基因小鼠（BALB／c，H-2K^d）模型，观察不同方法骨髓细胞移植后小鼠体内移植细胞的回巢、生存情况，移植细胞回巢与趋化蛋白SDF-1表达的关系，探讨不同方法骨髓移植后移植细胞回巢的时间规律、移植细胞数对回巢及生存率的影响、趋化蛋白SDF-1在造血细胞回巢中的作用，为解决造血干细胞来源-脐带血广泛应用问题和提高临床骨髓移植成功率提供新的思路。本研究分为三部分：1．骨髓移植后骨髓细胞回巢的时间规律①单次不同细胞数异基因骨髓细胞移植后不同时间点回巢效应观察实验设计：取受体鼠BALB／c白鼠96只，随机分为4组，每组24只。（60）^Co-γ射线全身致死性照射4小时后，分别按5×10⁵、1×10⁶、5×10⁶、1×10⁷不同细胞数移植供体C₅₇BL／6j黑鼠骨髓细胞。移植后24、48、72、96小时每组分别处死6只受体鼠，取外周血、骨髓细胞、脾细胞，分别检测（1）外周血（PBC）、骨髓细胞（BMC）、脾（SpC）细胞有核细胞计数；（2）流式细胞仪检测供体阳性细胞。动态观察单次移植后不同时间点的回巢情况。结果：不同时间点流式细胞仪检测外周血、骨髓、脾脏中的供体阳性细胞均以移植后第三天最高，组间差异极显著（P＜0.01）。外周血、骨髓、脾三者阳性细胞比例比较：第二天与第一天比，外周血升高，骨髓和脾均降低，第三天三者均升高，第四天再度降低。第一到第四天各组在骨髓中的平均回巢细胞数为0.625±0.241、0.245±0.147、0.346±0.131、0.227±0.094（1×10⁶）差别有显著意义（P＜0.05）。与平均回巢细胞数相同，第一到第四天骨髓的平均回巢率为36.10±6.69、16.89±5.83、25.96±7.34、14.92±4.49（％），显不一种高－低－高－低的趋势，差别亦有显著意义（P＜0.05），提示移植细胞博士论文 中文摘要在骨髓内的回巢在时间上有其高峰阶段。与骨髓的平均回巢率相对应，脾中的回巢率也有高／－高／ 的趋势，差异亦有显著意义（尸仍．05 ）o但与骨髓回巢不同的是，脾的回巢在后两天有升高的趋势，提示脾与骨髓的回巢高峰可能在不同的时间段。 ②不同次数混合骨髓细胞移植后不同时间点回巢效应观察 实验设计：取受体鼠BALB八白鼠32只，随机分为1次移植、2次移植、3次移植、4次移植4组，每组8 ．q。供体鼠为 C。BL仔j黑鼠和BALB／C白鼠，每次移植细胞数为 2．5 X 10Y只，各组移植顺序如下： 时间点4一时24人时48刁时72刁时 1次组 C钉BL／6j 2次组BALB／C CrBL／6j 3次组 BALB／ BALB／ C盯BL／6j 4次组 BALB／C BALB／C BALB／C C盯BL／6j 时间点为‘℃旷Y射线全身致死性照射后。 各组分别在移植乙，BL爬j黑鼠骨髓细胞后24小时处死，取外周血、骨髓细胞、脾细胞，分别检测（时＋周血炉BC入骨髓细胞（BMCX脾GPC）细胞有核细胞计数；Q）流式细胞仪检测供体阳性细胞。目的在于比较每次骨髓移植后的回巢情况。 结果：不同次数混合骨髓细胞移植后每次检测都观察到较高的回巢阳性细胞，受体鼠体内供体阳性细胞比例以骨髓最高，且骨髓中阳性细胞比例以2次移植组最高，组间比较差别统计学意义非常显著(尸＜0．01人 脾回巢的阳性细胞比例I次移植组检测明显高于其他组。骨髓的回巢阳性细胞数和回巢率以2次移植组最高，脾的回巢阳性细胞数和回巢率以17k移植组最高，组间差异均有显著统计学意义(尸＜0．05人提示每次骨髓移植后都会有较高的回巢，并且有时间段上的高峰，且脾的回巢规律与骨髓不同。 ③不同移植次数异基因骨髓移植后不同时间点回巢舰律观察 实验设计：取受体鼠BALB八白鼠96只，随机分为1次移植、2次 2博士论文 中 文摘要移植、3次移植、4次移植 4组，每组 24 ．q。供体鼠为 C。召L仔j黑鼠，每次移植细胞数为 2．5 X 100／只。各组分别在不同时间点各处死 6 ／q，检测方法与内容同“②”，观察不同次数程序移植后不同时间点的回巢情况。各组移植与检测顺序如下“。石L局j为移植，6 ．q为检测，时间点为’℃O－Y射线全身致死性照射后＊ 时间点1次组2次组3次组4次组 4小时 乙，BL／6j C。，BL／6j C。，BL／6j C。，BL／6j 24小时 6 ／q C幻BL／6j C所BL／6j C引BL／6j 48小时 6只 6 ／q C奸BL／6j C肝BL／6j 72小时 6只 6 ／q 6只 C幻／hi 96＊时6只6只6只6只 120 ’J’时 6只 6只 6只 144＊时6只6只 168J时6只 结果：不同移植次数骨髓移植后不同时间点流式细胞仪检测受体鼠体内供体阳性细胞比例以以第二天和第五天较高，第七天最低，差异非常显著(尸＜o．01?