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不同类型的超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）在许多理化性质上存在差异，如分子量、等电点、对热的稳定性以及对某些化学试剂的敏感程度。同时，不同种类的SOD在不同提取材料中的含量及分布部位也不尽相同。因此，针对不同来源、不同种类的SOD，采用的分离方法也有所区别。从猪血、螺旋藻、柑橘叶、猪肝中提取不同种类的SOD也就遵照了以上思路。 猪血经血液预处理、洗涤红细胞、溶血、乙醇-氯仿混合液除去血红蛋白，然后用K2HPO4 3H2O萃取、丙酮沉淀、55-65℃热变性得到粗酶液。粗酶液上阴离子DEAE-Cellulose 52交换层析柱、分子筛Sephadex G-75柱，最终获得了纯化的铜锌超氧化物歧化酶（Copper-and zinc-containing superoxide dismutase,Cu／Zn-SOD）。 螺旋藻经超声波破碎、50℃热变性、硫酸铵分级盐析、透析后得到粗酶液，然后上阴离子DEAE-Sepharose Fast Flow交换层析柱、阳离子CM-Sepharose FastFlow交换层析柱、分子筛Sephadex G-100柱，最终获得纯化的铁超氧化物歧化酶（Iron-containing superoxide dismutase,Fe-SOD）。 柑橘叶Fe-SOD、猪肝锰超氧化物歧化酶（Manganese-containing superoxidedismutase,Mn-SOD）分离纯化的过程与螺旋藻Fe-SOD大致相同，主要区别在前两者是剪碎，后者是超声波破碎；此外，硫酸铵分级盐析的梯度也不相同。 不同来源的纯化超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测基本上为单一条带，证明为纯化单一蛋白。紫外分光光度计、原子吸收分光光度计分别测定了不同来源的纯化SOD的吸收光谱及金属元素含量，证明它们分别是猪血Cu／Zn-SOD、螺旋藻Fe-SOD、柑橘叶Fe-SOD、猪肝Mn-SOD。 Sephadex G-75凝胶柱层析测定了猪血Cu／Zn-SOD、螺旋藻Fe-SOD、柑橘 W。A4＿＿。。＿＿WU 歹’刁XirkAIMWgr 叶Fe－SOD、猪肝Mn－SOD的分子量，依次为30，000、35000、453000、44，000， 数据基本上与文献吻合。十二烷基硫酸钠－聚丙烯酞胺凝胶电泳旧DS－PAGE) 测定了以上 SOD亚基的分子量，依次为 15，000、17，500、22，500、22，000，证 明猪血Cu／Zn－SOD、螺旋藻Fe－SOD、柑橘叶Fe－SOD、猪肝Mn－SOD均是由两 个亚基组成。 此外，不同来源的纯化SOD分子稳定性实验发现，ho－SOD、Fe－SOD对；热稳定性非常高，CobSOD稍差。另外，猪血C毗小SOD对兀刀，和KCN十 分敏感，但不受氯仿－乙醇混合液的影响；螺旋藻与柑橘叶FeSOD对H。Oy 氯 仿－乙醇混合液敏感，而KCN无明显抑制作用；H。O。和KCN对猪肝NlilSOD 活性无明显抑制作用，但氯仿－乙醇混合液对它的活性有较大影响。