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猪细小病毒是一种主要引起母猪繁殖障碍的病原,怀孕母猪感染猪细小病毒可能会出现返情、流产、产死胎、产木乃伊胎、产弱仔等临床症状。除了能引起母猪繁殖障碍外,猪细小病毒还能引起哺乳仔猪非化脓性心肌炎、仔猪渗出性皮炎、育肥猪间质性肾炎等疾病,另外与猪圆环病毒共同感染能够加重仔猪多系统衰竭综合征。本实验室从一育肥猪早、中期生产水平较差的猪场收集不同年龄段的育肥猪血清214份,用DNA提取试剂盒提取血清中的DNA,设计猪细小病毒特异性引物对214份血清DNA进行核酸检测,并选取其中7份经PCR检测为猪细小病毒阳性的血清用ST细胞进行病毒分离,盲传3代后,将病毒液冻融三次,用猪细小病毒特异性引物对7份血清接种的细胞液进行PCR鉴定,其中一份血清检测到了目的条带。确定分离到一株猪细小病毒,命名为PPV-16WS。通过观察细胞病变、测定血凝效价、分析部分全基因序列等方法研究病毒特性。结果显示,该病毒传至第5代能够出现较稳定的细胞病变,血凝效价能达到28,对其部分全基因组进行测序发现与GenBanK收录的传统的PPV序列同源性较高,其中与2012年时乐分离的YL株同源性最高,达到了99.0%,表明16WS是PPV。本研究建立检测PPV实时荧光定量PCR方法,为PPV病毒的初步定量检测奠定了基础。并对实验室分离株16WS进行传代对其培养条件进行摸索,主要包括：ST细胞生长状态、病毒孵育时间、细胞密度、病毒接种量、病毒收毒时间、培养体积、有无二氧化碳等条件,希望通过优化病毒培养条件来提高病毒滴度。结果显示：将生长48h的ST细胞传代12h后待细胞密度为60%(6.0-7.5×106cells/ml)时,进行分步接毒,孵育1h,接种量为107copies/ml,六孔板培养体积为2ml,放置5%二氧化碳培养箱培养72h,病毒滴度最高,能够稳定在3.59×109copies/ml左右。