耐盐型多环芳烃降解菌的筛选与鉴定

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背景:多环芳烃(PAHs)是一类环境中常见的持久性污染物,其种类多、分子结构稳定且构象复杂、毒性大、生物效应缓慢,可通过生物链积累,最终对人类健康造成危害。PAHs在环境中污染面广而分散,不易集中治理。利用微生物修复治理PAHs污染,具有经济、操作简单、无二次污染等其他方法不可替代的优势。因此研究PAHs的生物降解具有重要的现实意义。目的:多环芳烃降解菌的分离与筛选,菌种鉴定,降解菌特性以及降解基因的研究,以获得优良PAHs降解菌株。方法:1)采用富集培养和平板升华法相结合的方法以PAHs为唯一碳源进行筛选分离,获得能降解PAHs的菌株;2)对菌株的耐盐性、pH耐受范围、细菌形态、生理生化指标和16SrDNA序列进行分析,并构建系统进化树;3)对细菌的羟基化双加氧酶基因进行分析。结果:1)获得三株PAHs降解菌,命名为:wiq2、wjq3、wjq7,其中wjq2、wjq3以萘为唯一碳源生长,wjq7既可以萘又可以菲为唯一碳源生长;2)鉴定结果表明这三个菌株分别属于:变形门菌属(Proteobacterium sp.)、假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、节杆菌属(Arthrobacter sp.)。三个菌株可耐受盐(NaCl)浓度范围:wjq2为1%-7%、wjq3为1%-6%、wjq7为1%-8%,可在pH4-9范围内生长;3)以菌株的总基因组和质粒为模板扩增羟基化双加氧酶基因,均未得到阳性结果。结论:本实验分离到的三株菌株属于变形门菌属、假单胞菌属和节杆菌属,都有较强的耐盐性和广泛的pH生长范围。首次报道了节杆菌属的菌株既可降解萘又可降解菲,同时具有一定的耐盐性。这些菌株的发现对盐碱地域石油污染土壤的生物修复具有一定的应用价值。
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