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本文从鹿蹄橐吾中提取出水溶性粗多糖,并对其进行分离纯化,测定纯化多糖LW21的结构,对鹿蹄橐吾多糖的体外清除自由基进行了研究,为探讨鹿蹄橐吾多糖的药理活性,合理利用鹿蹄橐吾这种植物资源提供依据。
⑴从鹿蹄橐吾中提取出水溶性粗多糖LW。LW经GC分析表明其单糖组成为鼠李糖Rha,阿拉伯糖Ara,甘露糖Man,葡萄糖Glc,半乳糖Gal,半乳糖醛酸GalA,摩尔比为4.8:12.9:25.2:30.0:15.8:11.1。
⑵鹿蹄橐吾水溶性粗多糖LW经sevage法和酶法联合脱蛋白后,用酸性乙醇分级法得LW1和LW2两个级分,分别经DEAE-Sephadex A-25柱层析纯化,得多糖LW22和LW21。多糖LW21,LW22经Sepharose CL-4B柱层析检验,呈单一狭窄对称峰。纸层析呈单一斑点,醋酸纤维薄膜电泳呈单一谱带,表明多糖LW21,LW22在分子量大小和极性上都均一,为纯化多糖,LW21平均分子量约为110万,LW22平均分子量约为130万。
⑶多糖LW21经GC分析表明单糖组成为Rha,Ara,Man,Glc,Gal,摩尔比为7.4:11.9:25.7:40.0:14.9,LW22单糖组成为Rha,Ara,Man,Glc,Gal,GalA,摩尔比为15.3:8.2:19.7:31.1:13.2:12.2。多糖LW21,LW22结构分析采用了IR分析,高碘酸氧化,Smith降解,GC分析,甲基化及其产物GC-MS分析等方法。
⑷分析结果表明:多糖LW21为有分枝结构,主链由Man和Glc构成,其中Man主要以β(1→2)和β(1→6)糖苷键连接,β(1→2)糖苷键在2-O和4-O处有分枝,平均每2个糖残基有1个分枝,β(1→6)糖苷键连接,在3-O处和6-O处有分枝,平均每15个糖残基有7个分枝;Glc也主要以β(1→2)及β(1→6)糖苷键连接,β(1→2)糖苷键在6-O处有分枝,平均每3个糖残基有2个分枝,β(1→6)糖苷键连接,在2-O处有分枝,平均每11个糖残基有4个分枝。支链由Ara、Rha、Gal构成,其中Ara以1→2,1→4连接,Rha以1→2,1→5连接;Gal1→6,1→2,3或1→4,6连接。Gal、Ara、Rha、Glc都有一部分构成分子的末端残基。
⑸对鹿蹄橐吾水溶性多糖进行清除自由基。荧光分析法比分光光度法更灵敏,结果显示其具有较强的清除·OH-、O2-·的能力。