两株海洋溶藻菌及其次级代谢产物的研究

来源 :深圳大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:s04325102
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海洋微藻爆发引起赤潮,预防与控制海洋赤潮是当前世界性难题。在海洋的共生体系中,微藻和微生物之间已被证明存在特殊的共生体系,化学小分子在该共生体系中发挥着重要作用,其中海洋溶藻菌及其产生的杀藻活性物质受到了广泛的关注,被认为是生物控制赤潮最有发展潜力的方法之一。作为本实验室溶藻物质筛选工作的一部分,本文以20株来源于深圳大鹏半岛的海洋微生物(包括11株细菌、4株真菌和5株放线菌)和7株来源于永兴岛的海洋真菌为材料,通过发酵及溶藻活性筛查,从中筛选出具有红色赤潮藻溶藻活性的菌株14株,其中当发酵液提取物浓度为100μg·m L-1时,细菌HKB017、放线菌F2-2(Streptomyces sp.)、真菌Pte-L059-1和Bzo-L062-2(Myrothecium sp.)的杀藻活性在90%以上。对其中一株海洋溶藻真菌Myrothecium sp.Bzo-L062-2进行发酵培养基筛选,选择PDB液体培养基放大发酵。采用有机溶剂萃取法和开放硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、ODS柱色谱及高效液相色谱法等多种方法对Bzo-L062-2的次级代谢产物进行提取和分离,共分离纯化得到15个化合物,根据波谱特征及理化性质鉴定了其中11个化合物的结构,分别为Myrothspiroxepine(1)、2,6,8-三羟基-3,7-二甲基萘-1,4-二酮(2)、Aspergiodiquinone(3)、2,7-二羟基-6-(1-羟乙基)-3-甲基萘-1,4-二酮(4)、Terreinol(5)、2-羟基-6-甲基苯甲酸(6)、对甲基苯磺酰胺(7)、对羟基苯甲酸(8)、5-羟甲基-糠酸(9)、5-羟甲基-糠酸甲酯(10)、3,4-二羟基苯甲酸(11)。其中,化合物1、化合物2为未见文献报道的新化合物。此外,对海洋溶藻放线菌Streptomyces sp.F2-2进行大米固体培养基发酵,提取其次级代谢产物进行分离纯化,得到2个化合物,并根据波谱特征及理化性质鉴定了结构,分别为放线菌素D(12)和放线菌素X2(13)。进一步检测对羟基苯甲酸(8)、5-羟甲基-糠酸(9)、5-羟甲基-糠酸甲酯(10)、放线菌素D(12)、放线菌素X2(13)对海洋卡盾藻的溶藻活性,未发现显著活性。此外,对红色赤潮藻以及其他有害微藻的活性实验目前还在进行。未来需要进一步对纯化合物的溶藻活性及溶藻机理做深入研究。
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