哺乳动物卵巢卵母细胞发育的研究，最初主要关注生殖细胞形成的早期阶段或出生后卵泡的生长发育。而原始卵泡的体外形成与发育激活方面，虽然有小鼠原始卵泡体外培养发育并可获得成熟的卵母细胞的报道，但减数分裂前的雌性生殖细胞不能在体外完成这一卵母细胞发生与成熟的整个过程。对于原始生殖细胞分化的研究来说，真正的挑战是建立雌性原始生殖细胞的体外分化与发育体系，这对于开发卵母细胞资源并用于生物和医学研究，了解原始卵泡形成与发育启动的调节机制等是至关重要的。　　 本研究主要是对12.5dpc胎鼠卵巢进行体外培养14d，诱导卵巢卵母细胞的体外生长发育，通过在培养液中添加低浓度insulin(200～1000ng/ml)、高浓度insulin(5～20μg/ml)、FSH(10～50mIU/ml)或ITS(insulin1mg/ml,transferrin0.55mg/ml,selenium5ng/ml)(0.5～2％)，来比较分析insulin，ITS和FSH对小鼠卵母细胞发生、原始卵泡形成与发育激活的影响。胎鼠卵巢体外培养10d时，开始看到有卵泡生成，添加insuin的试验组中卵泡数很少(20±6.67～10±2.02个/卵巢)。高浓度的insulin抑制卵泡的形成，随着浓度的升高，次级卵泡的形成受到抑制，当达到20μg/ml时，卵巢上没有出现次级卵泡。添加ITS的试验组培养效果与添加insulin的试验组相似。体外培养14d时，体外对照组中卵巢卵母细胞直径为45.75±2.44μm，而单独添加高浓度insulin或低浓度insulin的试验组直径为38.45±3.15μm、43.5±3.19μm，添加ITS的试验组直径为43.35±2.18μm，三个试验组卵母细胞直径都与对照组差异显著(p＜0.05)。由上述可见，在本研究的试验条件下，ITS或insulin对于12.5dpc胎鼠卵巢卵母细胞的生长发育是抑制的。　　 添加FSH的试验组，在体外培养10d时，卵泡数目较多，与对照组差异显著，且随着添加浓度的增大(10～50mIU/mlFSH)，卵泡数量明显增加(33.2±11.22～56±11.16个/卵巢)。各级卵泡的比例变化基本相似。体外培养14d时，添加FSH的试验组直径为47.31±2.84μm，与对照组差异显著(p＜0.05)。然后，又检测了FSH与ITS或insulin的联合作用，选择培养效果最好的因子添加剂量，检测结果显示卵母细胞直径分别达到40.59±3.42μm与41.75±3.24μm，卵母细胞生长状况都不如对照组，且与对照组差异显著(p＜0.05）。本文中还检测了小鼠卵母细胞的特异基因等表达情况，发现体外发育的卵母细胞的特异基因表达与正常小鼠的没有显著差异。由上述可见，在本研究的试验条件下，在12.5dpc胎鼠卵巢的体外培养中FSH对卵巢卵母细胞的发育是起促进作用的，且20mIU/mlFSH的试验组培养效果最好，同时，通过比较20mIU/mlFSH与1％ITS或20mIU/mlFSH与5μg/mlinsulin的相互作用，发现FSH与insulin两种因子之间的相互作用抑制了卵母细胞的生长。ITS与insulin可能都对FSH起抑制作用。