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目的:本研究旨在运用DNA条形码、高分辨熔解曲线、HPLC和近红外光谱四种技术对鄂西北地区柴胡种及质量两方面进行分析,为柴胡种快速鉴别和质量分析提供研究基础。方法:(1)采集鄂西北地区柴胡属植物北柴胡、狭叶柴胡、竹叶柴胡和三岛柴胡等4种植物样品。提取植物总DNA利用ITS序列和psbA-trn H序列PCR扩增,产物测序结果经CodonCode Aligner 9.5软件进行拼接,MEGA6.06软件对最终序列进行分析,基于K2P模型构建NJ树。(2)将4种12份柴胡属植物DNA样品,用ITS2通用引物建立柴胡熔解曲线模型,并对4种柴胡属植物进行定性鉴别。(3)收集市场销售柴胡药材48批HPLC法测定柴胡皂苷a、d含量,考察柴胡质量(4)对58批柴胡药材进行近红外光谱采集,以HPLC法测定柴胡皂苷a、d含量数据作为参考,首先使用K-S算法将58批柴胡样品划分为训练集和验证集,筛选出光谱最佳预处理方法,特征谱段以及SVM模型优化方法。分别利用PLS算法和SVM算法将训练集柴胡药材近红外光谱数据分别与柴胡皂苷a、d含量参考值进行匹配,建立定量分析回归模型。结果和结论:(1)鄂西北柴胡属植物ITS序列长度在534-536bp,种内最大遗传距离小于种间最小遗传距离。4种柴胡属植物NJ树各为独立一支,均能得到良好区分。psbA-trnH序列长度在443bp左右,种内最大遗传距离大于种间最小遗传距离,无法用于鉴别4种柴胡属植物。因此ITS序列作为DNA条形码,对鄂西北4种柴胡属植物具有良好的鉴别能力。(2)4种柴胡属样品进行HRM实验分析,发现4种柴胡属DNA样品熔解曲线均为单峰且各种样品Tm值彼此分开。北柴胡熔解曲线Tm为(89.40±0.04)℃;狭叶柴胡熔解曲线Tm为(89.97±0.07)℃;竹叶柴胡熔解曲线Tm为(89.28±0.04)℃;三岛柴胡熔解曲线Tm为(89.74±0.08)℃。利用此模型,比较熔解曲线峰型和Tm值即可对4种柴胡属植物进行鉴别。(3)实验结果表明,除4、9、30号样品外,其他样品柴胡皂苷a、d总含量均符合《中国药典》(2015版)规定的标准(4)近红外定量分析柴胡确定了:以FD+MSC为预处理方法,8750~6000cm-1范围光谱为最佳谱段,网格寻优法为最佳优化方法的柴胡皂苷a定量分析模型;无预处理光谱,以8750~6000cm-1,4500~4100cm-1为最适谱段,GA法为最佳优化方法的柴胡皂苷d定量分析模型。两个分析模型RMSECV值分别为1.2471和1.4956,对柴胡皂苷a、d的定量分析有很好的鉴别精度和预测能力,可用于柴胡含量测定的快速鉴别。