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【背景】乳腺癌是一种女性常发恶性肿瘤,我们的前期工作及国内外的相关报道均证实,乳腺癌的发生与Hedgehog信号通路的过度激活有着密切的联系。Rab23是2001年发现的一个新的Hedgehog信号通路负调节分子,研究表明Rab23可能是位于细胞跨膜蛋白SMO和转录因子Gli传导通路之间的负性调节信号分子,抑制通路信号向Gli的传递。本研究首次阐明了Rab23分子在乳腺癌细胞中的表达及通过Hedgehog信号通路对乳腺癌细胞生长增殖的抑制作用,而且这种抑制作用与乳腺癌ER+/ER-可能无相关性,进一步丰富了乳腺癌的发病机理的研究,为临床治疗乳腺癌提供了一条新思路。【目的】明确Rab23分子在不同类型的乳腺癌细胞中是否表达及表达量情况,探讨Rab23分子对乳腺癌细胞生长增殖的作用及机制,讨论Rab23对Hedgehog信号通路的具体作用。【方法】1.运用RT-PCR和免疫荧光化学技术检测Rab23分子在乳腺癌细胞系和正常乳腺细胞中的表达。2.运用质粒转染和RNAi技术分别提高和降低Rab23分子在三种乳腺癌细胞中的表达。3.运用克隆形成试验和MTT试验检测Rab23对乳腺癌细胞生长的影响。4.运用BrdU掺入试验检测Rab23对乳腺癌细胞DNA合成的影响。5.运用流式细胞技术检测Rab23对乳腺癌细胞凋亡的影响。6.运用RT-PCR技术检测Rab23对Hedgehog信号通路中的Gli1、Gli2的作用。【结果】1.RT-PCR结果显示在正常乳腺细胞和乳腺癌细胞系中均有Rab23 mRNA的表达,且在MCF-7细胞中表达量最少,其次为HBL-100细胞,表达量最多的是MDA-MB-231和Bcap-37(P<0.05),后两者比较无统计学差异(P>0.05)。2.免疫荧光染色提示Rab23分子主要分布在乳腺癌细胞胞核周围的胞质中。3.克隆形成实验提示,上调Rab23可显著减少乳腺癌细胞系集落形成数量,上调Gli1其集落形成数量明显增加。4.BrdU掺入实验提示,上调Rab23可显著减少乳腺癌细胞的DNA合成,而下调Rab23可显著提高乳腺癌细胞的DNA合成。5.MTT实验显示,上调Rab23可显著抑制乳腺癌细胞生长,而下调Rab23可显著促进乳腺癌细胞生长。6.流式细胞术显示上调Rab23可增加乳腺癌细胞凋亡。7.RT-PCR结果显示,上调Rab23可显著降低乳腺癌细胞Gli1、Gli2 mRNA水平。【结论】1.Rab23在MDA-MB-231、Bcap-37、MCF-7三种乳腺癌细胞中均有表达,且在MDA-MB-231和Bcap-37中表达较多。2.Rab23对乳腺癌细胞生长、增殖有抑制作用。3.Rab23可降低乳腺癌细胞系中Hedgehog信号通路激活状态。