【背景与目的】葡萄糖调节蛋白78（Glucose regulated protein 78,GRP78）属热休克蛋白70家族成员,又被称为热休克蛋白A5（Heat shock protein A5,HSPA5）。GRP78作为内质网伴侣分子,能帮助内质网中新合成的蛋白分子正确折叠,维持内质网稳定。在营养缺乏、缺氧、缺血等应激状态刺激下,表达增加的GRP78可从内质网逃逸至细胞浆、细胞核、细胞膜表面或分泌至周围微环境中,发挥特定功能。1型糖尿病（Type 1 diabetes,T1D）是以胰岛β细胞特异性损伤引起的胰岛素分泌不足为特点,由T细胞介导的自身免疫性疾病。免疫抑制细胞过继输注作为一种新型的免疫治疗方法在慢性自身免疫性疾病中显示出良好的应用前景。其中,耐受型树突状细胞（Tolerogenic dendritic cells,tol DCs）已用于T1D等多种自身免疫性疾病治疗的实验研究。本课题组前期研究发现,sGRP78能诱导BALB/c小鼠来源的DCs（GRP78-DCs）成为具备耐受型特征的免疫抑制细胞。因此,sGRP78能否诱导NOD源性DCs形成耐受、该GRP78-DCs过继回输能否抑制NOD小鼠T1D的发生发展是值得研究的课题。在比较健康小鼠各脏器GRP78的表达模式时,我们发现sGRP78在肠道组织中高表达。肠道黏膜免疫系统耐受的形成依赖于免疫系统调节机制的存在。调节性细胞在肠道中作为重要的免疫抑制细胞,决定了肠道疾病的转归。溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）是一种多因素造成的累及结肠的慢性炎症性疾病,且炎症的持续存在使结肠癌（Colorectal cancer,CRC）的累及风险增加18%。有研究发现,B细胞缺陷小鼠肠炎明显加重而肠癌进展变缓,提示B细胞在肠道疾病中发挥重要作用。本课题组前期研究也显示,sGRP78能够诱导脾脏来源的B细胞分化成为CD19hiPD-L1+Fas L+并分泌IL-10的B细胞。因此,研究肠组织中GRP78分泌的动态变化及其对B细胞的影响及潜在机制,并研究其在肠炎及肠癌中的作用规律,能为溃疡性结肠炎以及结直肠癌的发生发展提供新见解。【方法】1.重组小鼠GRP78蛋白处理NOD小鼠BMDCs（GRP78-DCs）,体外鉴定其表型及分泌细胞因子谱;体内评价回输的GRP78-DCs在NOD小鼠内的迁移及其输注对小鼠胰岛炎症状态的影响;2.检测DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型、结肠癌患者及AOM/DSS诱导的结肠炎相关结肠癌小鼠模型中肠组织GRP78分泌及肠固有层B细胞表型;体内外检测sGRP78输注对小鼠结肠炎和结肠癌发生发展及对B细胞表型及功能的影响。【结果】1.sGRP78处理的NOD鼠BMDCs表现出耐受性表型,炎性因子表达下调;2.GRP78-DCs回输NOD小鼠后,聚集在小鼠胰腺组织;GRP78-DCs回输明显减轻NOD小鼠胰岛淋巴细胞浸润,减少炎症因子分泌;3.在DSS诱导的溃疡性结肠炎模型、结肠癌患者、AOM/DSS诱导的小鼠结肠癌模型中,肠组织分泌GRP78增加,PD-L1+B细胞比例增加;4.sGRP78腹腔注射明显缓解DSS诱导的小鼠结肠炎症状,但促进AOM/DSS诱导的小鼠结肠癌发生,两种模型中PD-L1+B细胞比例均升高;5.体外实验证实sGRP78能与B细胞膜分子结合;sGRP78处理的B细胞（GRP78-B）内pSTAT3水平显著增加、PD-L1表达增高;GRP78-B能抑制T细胞的增殖,促进其凋亡。【结论】sGRP78能诱导NOD小鼠来源的DCs形成耐受,该细胞自体回输能缓解自发1型糖尿病的NOD小鼠的胰岛炎;腹腔注射sGRP78能缓解小鼠结肠炎,但促进小鼠结肠肿瘤的生长,可能机制为sGRP78通过活化STAT3促进B细胞表达PD-L1,发挥免疫调节功能。