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第一部分放射性碘标记新型分子探针多肽F3目的:建立放射性碘标记新型分子探针多肽F3的方法学,并与放射性碘标记的西妥昔单抗(Cetuximab,以下简称为Ab)作比较,探究放射性碘标记F3的理化性质。方法:利用氯胺-T法实现F3多肽和Ab的125I标记,用Sephadex G-25柱分离纯化,测定标记率、放射化学纯度和体外稳定性。结果:新型分子探针多肽F3可被125I标记,标记率为(88.0±0.5)%,纯化后的放射化学纯度为(99.1±0.2)%;125I-Ab的标记率为(90.8±1.9)%,纯化后的放射化学纯度为(91.5±2.0)%。125I-F3和125I-Ab在4℃条件下存放较稳定,放置8h时其放射化学纯度均可达到90%以上。结论:氯胺-T法成功标记多肽F3,并且标记率及放射化学纯度高,体外稳定性较好,适合4℃保存。此方法操作简便、可重复性好,为下一步实验打下基础。第二部分125I-F3实现三阴性乳腺癌SPECT/CT显像的实验研究目的:通过三阴性乳腺癌细胞4T1的细胞结合实验、荷三阴性乳腺癌4T1细胞裸鼠的体内分布及SPECT/CT显像,验证125I标记的新型分子探针多肽F3对三阴性乳腺癌的靶向显像能力。方法:通过细胞结合实验比较125I-F3和125I-Ab与三阴性乳腺癌细胞4T1的结合能力;建立裸鼠三阴性乳腺癌皮下移植瘤模型,经荷瘤裸鼠尾静脉注射300μCi/200μL标记物,分别于注射后即刻、1h、2h、4h、6h、8h和24h行SPECT/CT显像,观察125I-F3和125I-Ab在荷瘤裸鼠中的显像结果;取30只雌性荷瘤裸鼠,随机分成两组(125I-F3组和125I-Ab组),经尾静脉注入标记物注射液40μCi/200μL,分别于注射后0.5h、1h、2h、4h和8h眼球取血后处死,取心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、骨、肌肉、肿瘤及皮肤等组织器官,计算各组织器官每克组织的百分注入剂量(%ID/g),比较尾静脉注射后不同时间,125I-F3和125I-Ab在荷瘤裸鼠的体内分布情况。结果:在1h、2h、4h、8h及24h,125I-F3与4T1细胞的结合率分别为(4.32±0.18)%、(7.34±0.73)%、(10.58±0.16)%、(10.76±0.35)%及(13.76±0.73)%,125I-Ab与4T1细胞的结合率分别为(0.32±0.05)%、(0.49±0.05)%、(0.73±0.04)、(0.90±0.06)%及(1.77±0.36)%。125I-F3及125I-Ab细胞结合率均随作用时间延长而增高,125I-F3在2h以后的细胞结合率与1h相比,有显著性差异(P<0.01);125I-Ab在2h的细胞结合率与1h相比,差异无统计学意义(P>0.05),4h与1h相比,差异有统计学意义(P<0.05),8h以后的细胞结合率与1h相比,有显著性差异(P<0.01)。SPECT/CT显像示尾静脉注射125I-F3后1h即能显示肿瘤部位,随着时间延长,裸鼠本底降低,肿瘤部位的显像更清晰,在药物注射后4h时肿瘤部位显像最清晰,之后肿瘤部位的放射性逐渐减少,至注射后24h肉眼已观察不到肿瘤显像;尾静脉注射125I-Ab后1h肿瘤部位可见淡影,随着时间延长,裸鼠本底降低,至注射后2h肿瘤部位放射性达高峰,随后肿瘤部位的放射性迅速减少,至注射后8h肉眼已难辨肿瘤部位显影。体内分布显示尾静脉注射125I-F3后2h,肿瘤部位放射性摄取最高,达到(3.16±0.05)%,随后肿瘤部位放射性降低,至8h时,降低到(0.84±0.09)%;尾静脉注射125I-Ab后1h,肿瘤部位放射性摄取最高,为(2.46±0.49)%,随后肿瘤部位放射性降低,至8h时,降低到(0.81±0.53)%。结论:125I-F3可与三阴性乳腺癌细胞4T1结合,并可在三阴性乳腺癌肿瘤部位特异性聚集,可能成为三阴性乳腺癌的靶向显像剂。第三部分131I-F3治疗三阴性乳腺癌的实验研究目的:通过荷瘤裸鼠瘤内给药研究131I-F3对三阴性乳腺癌的内照射治疗作用,并通过免疫组化测定肿瘤部位的EGFR表达证实治疗有效。方法:用氯胺-T法实现F3和Ab的131I标记;验证对荷瘤裸鼠的治疗作用,实验组瘤内注射131I-F3 50μL/只(约200μCi/只),设131I-Ab为对照组一及生理盐水为对照组二;首次注射完成后,隔天重复注射一次,共注射3次。通过HE染色和免疫组化检测未治疗和各组治疗后的肿瘤组织中EGFR表达情况。结果:131I-F3的标记率为(92.0±2.1)%,131I-Ab的标记率为(89.2±0.4)%。FX Pro小动物成像系统显像示治疗第5天,两组肿瘤部位均可显像,但放射性不等;随治疗时间延长,两组肿瘤部位的放射性均减少。治疗20天后131I-F3组抑瘤率为(11.46±7.78)%;131I-Ab组抑瘤率为(37.76±14.68)%。HE染色显示肿瘤细胞的生长受到抑制,免疫组化显示治疗后肿瘤内EGFR表达减少,阳性细胞比例较对照组少。结论:131I-F3可对三阴性乳腺癌肿瘤细胞的生长起抑制作用,有可能成为一种有临床应用价值的内照射治疗药物。