【摘 要】
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植物内生真菌是植物微生物群落的重要组成部分,其丰富的次级代谢产物不仅能够提高宿主植物对逆境的适应性和抵抗性,同时也表现出一系列的生物活性,包括抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、免疫抑制以及对植物病原菌和农业害虫的生防能力等。人参作为我国名贵的中药材,其化学成分及药理活性丰富,但人参对生长环境要求较高,极易受病原菌侵染而产生病害,严重影响人参产量和品质。本研究以五加科人参属植物人参（Panax g
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植物内生真菌是植物微生物群落的重要组成部分,其丰富的次级代谢产物不仅能够提高宿主植物对逆境的适应性和抵抗性,同时也表现出一系列的生物活性,包括抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、免疫抑制以及对植物病原菌和农业害虫的生防能力等。人参作为我国名贵的中药材,其化学成分及药理活性丰富,但人参对生长环境要求较高,极易受病原菌侵染而产生病害,严重影响人参产量和品质。本研究以五加科人参属植物人参（Panax ginseng C.A.Meyer）为研究对象,分离鉴定其根组织中的内生真菌,筛选出具有生防潜力的内生真菌菌株。批量发酵内生真菌菌株,对其次级代谢产物进行分离纯化,对得到的单体化合物进行结构鉴定和抑菌活性进行评估,研究结果如下:利用组织分离法对健康人参根组织内生真菌进行分离,共分离得到3种内生真菌菌株GS1、GS2、GS3,利用分子生物学方法鉴定分别为Fusarium tricinctum、Botryotrichum murorum、Doratomyces columnaris。以四种植物病原菌:立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）,腐皮镰孢菌（Fusarium solani）,灰葡萄孢（Botrytis cinerea）,核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）为供试菌株,通过对峙培养筛选出对植物病原菌具有抑制作用的内生真菌,根据对峙培养结果,以对四种植物病原菌都具有抑制效果的GS1菌株（三线镰孢菌,Fusarium tricinctum）为研究对象,对其次生代谢产物成分进行研究。采用燕麦液体培养基大批量发酵Fusarium tricinctum菌株,对菌液和菌丝提取物进行抑菌活性追踪,发现菌液和菌丝提取物对4种植物病原菌均有明显的抑制效果,将菌液菌丝部分合并后萃取,得到的各萃取相继续进行抑菌活性追踪,利用多种色谱技术对具有植物病原菌抑制作用的发酵产物石油醚和乙酸乙酯萃取相进行化学成分的分离纯化,最终得到6种次级代谢产物,核磁共振波谱技术解析确定化合物结构,分别为（1R,2R,4a S,8a S）-Decahydro-1-（6-hydroxy-3-methyl-3-hexen-1-yl）-2,5,5,8a-tetramethyl-1-naphthalenol、enniatin I、2-Hydroxy-6（Z）-hexadecenoic acid、terretonin、lupeol、3β-hydroxy-cholesta-5-ene。对分离得到的化合物进行植物病原菌的体外抑菌活性测试,测试结果表明化合物2对立枯丝核菌（R.solani）、腐皮镰孢菌（F.solani）、灰葡萄孢（B.cinerea）和核盘菌（S.sclerotiorum）都表现出良好的抑制效果,对核盘菌和灰葡萄孢抑制效果明显,在浓度为25μg/m L时,对核盘菌的抑制率达到了83.41±4.66%,在浓度为50μg/m L下,对灰葡萄孢的抑制率达到81.83±5.07%,对立枯丝核菌和腐皮镰孢菌也表现出一定的抑制作用,其他化合物无活性。该研究丰富了人参内生真菌的多样性,为内生真菌及其次级代谢产物用于生物防治植物病害提供了参考。
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