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目的:骨髓抑制是临床上化疗后常见的不良反应,可引起骨髓造血微环境、造血干/祖细胞、造血基质细胞等的损伤。化疗后骨髓抑制的主要症状如头痛头晕、疲乏无力、腰膝酸软、恶心呕吐、食欲不振、眠差、梦多易醒、出血及低热等,可归属于中医“血虚”、“虚劳”等病证范畴,越来越多研究表明气血亏虚可以导致血瘀,血瘀又进一步加重气血损伤。中医药对治疗骨髓抑制有着独特自身优势,如中医药的整体调理作用、提高机体适应性等作用,在骨髓抑制不良反应中有很好的作用。本实验根据中医“瘀血不去、新血不生”的理论,选用四物汤加大黄蛰虫丸研究“祛瘀生新”对促进化疗所致骨髓抑制血虚小鼠造血恢复的作用及其机理,以丰富中医祛瘀生新理论的科学内涵。 方法:采用腹腔注射环磷酰胺建立骨髓抑制贫血小鼠动物模型,通过体内实验,运用细胞培养、病理切片、流式细胞术、分光分析法等细胞学、分子生物学、生物化学实验技术,观察基于祛瘀生新中药复方对化疗所致骨髓抑制小鼠骨髓组织形态学、骨髓细胞周期和细胞凋亡情况、骨髓基质细胞增殖、脾脏抗氧化作用等的影响,初步探讨“祛瘀生新”促进化疗所致骨髓抑制小鼠造血恢复的作用及机制。 结果:(1)四物汤、大黄蛰虫丸均能不同程度拮抗化疗后所致小鼠骨髓抑制,增加外周血红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白、骨髓有核细胞数,其中低高剂量合方组、四物汤组对上述指标有显著性差异,尤以低剂量合方组效果最为显著,四物汤组次之,而低高剂量大黄蛰虫丸组仅有增高趋势,无统计学意义。 (2)四物汤和低高剂量合方组均能明显促进骨髓抑制小鼠骨髓细胞进入细胞周期,使G1期细胞比例减少,S期和G2/M期细胞比例增加,从而增加骨髓细胞的增殖指数(PI),并同时减少骨髓细胞凋亡,其中以低剂量合方组的作用最强,四物汤次之。而低高剂量大黄蛰虫丸组仅表现出趋势,无统计学意义。 (3)四物汤和低高剂量合方组能明显促进骨髓抑制小鼠骨髓成纤维细胞集落形成,并以低剂量合方组的作用最强,四物汤组次之。低高剂量大黄蛰虫丸组均无明显的刺激作用。 (4)四物汤和低高剂量合方组均能拮抗环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠脾脏氧化损伤,能显著增加SOD的活性,降低MDA的含量,其中以低剂量合方组效果最好,四物汤次之。低高剂量大黄蛰虫丸组则效果并不明显,仅表现出SOD活性升高和MDA含量降低的趋势,无统计学意义。 结论:四物汤、大黄蛰虫丸均能不同程度加快化疗所致骨髓抑制小鼠造血功能恢复,但是它们的作用强度有差异:①低剂量合方组对造血系统的修复作用最强,提示一定剂量下,四物汤合用大黄蛰虫丸有协同增效的作用,体现了中医“祛瘀生新”理论的运用;②低剂量大黄蛰虫丸与四物汤合用的协同增效作用机理,可能和改善造血微环境,减轻骨髓间质充血、水肿,促进主要基质细胞骨髓成纤维细胞增殖,促进骨髓细胞增殖、减少细胞凋亡率,减轻环磷酰胺所致氧化损伤等有关。③单独使用大黄蛰虫丸,不管低剂量还是高剂量,其效果都不明显,且高剂量的大黄蛰虫丸与四物汤合用,其效果甚至没有单用四物汤的效果好,说明血瘀并不是环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠的主要证候,而是其主要兼证,血虚才是其主要证候,故当以补血为主。