氮限条件下植物激素对裂殖壶菌积累油脂及DHA的研究

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二十二碳六烯酸(DHA)是目前发现碳链最长的ω-3系列的多不饱和脂肪酸,具有促进婴幼儿大脑发育、预防和治疗心血管疾病、改善视网膜功能等重要生理功能。裂殖壶菌(Schizochytrium)因其具有丰富的油脂和DHA,生长周期短而成为工业化生产DHA的模式菌种之一。目前,已有多种措施用于促进裂殖壶菌中油脂和DHA产量提升,以降低DHA的生产成本,但采用植物激素和氮限制条件下添加植物激素提高裂殖壶菌油脂和DHA产量的研究鲜见报道。因此本论文拟先筛选出促进裂殖壶菌油脂和DHA产量提升幅度较大的植物激素,然后再利用在氮限制条件下添加植物激素进一步促进裂殖壶菌中油脂和DHA产量提升。以期为裂殖壶菌获取更高产量的油脂及DHA提供一种新的研究思路。主要研究内容如下:1.六种植物激素促进裂殖壶菌中油脂产量及DHA产量提升的最适浓度分别是:萘乙酸(NAA):0.04 mg/L;6-苄基腺嘌呤(6-BA):0.08 mg/L;赤霉素(GA):0.5 mg/L;2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D):1.5 mg/L;己酸二乙氨基乙醇酯(DA-6):0.05 mg/L;茉莉酸甲酯(Me JA):15 mg/L。其中2,4-D、DA-6、Me JA三种植物激素促进裂殖壶菌油脂产量及DHA产量提升幅度较大,油脂产量分别为17.69 g/L、19.06 g/L、18.19 g/L,相比于对照组的油脂产量分别提高了74.24%、85.58%、77.11%,DHA产量分别为6.94 g/L、7.23 g/L、7.22 g/L,相比于对照组的DHA产量分别提高了61.39%、70.92%、70.68%。2.裂殖壶菌在氮源限制条件下促进油脂和DHA产量提升较大的是谷氨酸钠(MSG)浓度为5 g/L时,确定了最佳氮限制(MSG-L)浓度为5 g/L。裂殖壶菌在最佳氮限制(MSG-L)条件下分别添加2,4-D、DA-6、Me JA三种植物激素,与其单独在氮限制条件下相比,其油脂产量和DHA产量均有显著提高。并且进一步确定了裂殖壶菌在氮限制下添加植物激素2,4-D、DA-6、Me JA的最佳时间分别为0 h、48 h、0 h。3.氮限制条件下添加植物激素后诱导了裂殖壶菌细胞中抗氧化酶SOD、CAT的活性提高,有效缓解了氮限制环境下的氧化应激;促进裂殖壶菌细胞内类胡萝卜素的合成;降低裂殖壶菌细胞内蛋白质和多糖含量。该结果间接解释了在氮限制条件下添加植物激素进一步促进裂殖壶菌油脂和DHA积累的原因。
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