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去整合素(disintegrins)是从蛇毒中提取的一类同源性很高的多肽,含有Arg-Gly-Asp(RGD)序列或Lys-Gly-Asp(KGD)序列,半胱氨酸含量丰富,分子量为5~9kD[1]。因为大部分细胞整合素(integrins)都能识别RGD序列,而大多数细胞外基质(extracellular matrix,ECM)蛋白成分都含有RGD序列,故去整合素可凭借其RGD识别序列而成为细胞外基质与细胞整合素间结合的强有力的竞争性拮抗剂,从而抑制整合素参与的多种生理活动。去整合素Adinbitor是由来自于中国旅顺的白眉蝮蛇又名短尾蝮(Gloydius brevicaudus),学名为Agkistrodon halys brevicaudus stejneger的蛇毒中克隆得到的。Adinbitor由73个氨基酸残基组成,含有12个半胱氨酸残基和1个去整合素特征性RGD三肽识别序列,相对分子量为9kD,为去整合素家族的新成员,故可作为多种整合素受体的强有力的拮抗剂,具有抑制肿瘤的作用。肿瘤的发生是一个多因素、多阶段的长期复杂的过程,其细胞信号传递系统出现了明显的缺陷,整合素作为信号传导者发挥着重要作用。研究证明不同的整合素成员在肿瘤细胞内的表达水平有差异,在肿瘤发生的不同阶段表现为截然不同的作用,表明整合素可通过传递特定的信号或诱导基因表达来调控肿瘤细胞的粘附、增殖、浸润和转移、凋亡以及肿瘤血管的生成等事件。而所有的去整合素都具有其生物学活性所必需的RGD特异性识别序列,凭借此序列去整合素可作为多种整合素受体的强有力的拮抗剂,抑制整合素在肿瘤发生过程中的各种作用。已经发现去整合素能够抑制肿瘤细胞对纤连蛋白、玻连蛋白、层粘连蛋白和胶原的粘附,从而抑制肿瘤细胞的生长、浸润和转移,同时去整合素还具有诱导肿瘤细胞发生凋亡的特异作用。鉴于此,本论文将冻存的新鲜阳性表达菌E.coli BL21,即其已完成带有组氨酸标签的重组质粒pET23b-adinbitor的转化和鉴定,进行复苏和IPTG的诱导表达,得到重组蛋白Adinbitor的可溶性高效表达,经组氨酸亲和层析柱纯化,获得了分子量为9kD的去整合素Adinbitor,从而在去整合素Adinbitor对人胃癌细胞