纳米氧化锌固定酿酒酵母的研究

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全细胞催化近几年来越来越多地被应用到了各个领域,传统的全细胞固定化方法如包埋法、交联法、吸附法等存在一定的缺陷,如固定效率低、工艺复杂、细胞固定后催化活性低等。本文根据纳米氧化锌在极性溶液中能够相互吸附而絮凝的特性,将纳米氧化锌作为固定化材料固定酿酒酵母,并对其固定化能力及对菌体活性的影响进行评价,以发掘纳米氧化锌在全细胞固定化方面的潜在应用价值。主要分为以下四部分内容:第一部分,对材料固定酵母全细胞的方法进行了确定,该方法操作简便,固定迅速,固定后不会导致酵母细胞发生明显畸变或破裂。材料的固定化能力较好,1g15nm氧化锌颗粒材料能够固定18g酿酒酵母(湿重)。第二部分,进一步探究了纳米氧化锌固定酿酒酵母的最佳条件与适用范围。15nm氧化锌颗粒经过2h40k超声波处理后固定酿酒酵母达到最大量,固定后于100rpm振摇条件下能够保持100%固定率20h以上。纳米氧化锌-酵母复合物相较于游离酵母所需离心转速下降63.4%,所需离心时间下降83.3%。但该固定化方法对溶液环境的要求高,不能在溶液中含有带有非极性端的物质时进行固定。第三部分,根据固定前后酿酒酵母催化AMP生成ATP活力的测定对固定对酵母的活性造成的影响作出评价,结果显示固定化酵母催化该反应活性较未固定酵母下降了5%-10%;固定对酿酒酵母细胞最佳反应条件(缓冲液浓度、底物浓度、pH、温度等)没有影响。第四部分,对该固定化方式下进行催化后分离得到的上清液的抗菌能力进行了初步测定,结果显示在催化反应中使用含有1*10-2g/ml及以上浓度的纳米氧化锌固定细胞,能够使反应液及分离后的反应上清液具有针对原核生物较好的抗菌能力。
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