本论文共有四部分组成:一)流感病毒基本特征和特性、流感病毒对孕妇和婴幼儿的危害、母源性抗体相关知识的简介;二)H5N1 HA DNA与全病毒灭活疫苗诱导的母源性抗体在保护母鼠及子鼠抗流感病毒感染中的效果研究;三)粘膜免疫在克服母源性抗体对子代主动免疫应答干扰中的研究;四)H5N1HADNA疫苗在克服母源性抗体对子代主动免疫应答干扰中的研究。一)以综述的形式介绍了 A型流感病毒的基本特征和特性、历次流感大流行及季节性流感对妊娠妇女、胎儿及婴幼儿的危害、临床流感疫苗在婴幼儿中的应用现状、母源性抗体保护婴幼儿抗病毒感染的机理及应用、母源性抗体对婴幼儿主动免疫应答的干扰性、干扰机理及克服母抗干扰的一些策略等。二)与季节性流感病毒不同,人类普遍缺少抗H5N1流感病毒pre-existing免疫力,孕妇和婴幼儿都属于流感病毒感染高危人群,母体接种H5N1流感病毒疫苗是保护母体或新生儿获得抗H5N1流感病毒感染保护力的重要途径。在临床试验中,H5N1流感病毒裂解疫苗和亚单位疫苗免疫原性较低,WHO(World Health Organization)鼓励进行H5N1流感病毒新型疫苗的研究,DNA疫苗是一种可供选择的流感病毒新型疫苗。本研究以BALB/c小鼠为动物模型,重点研究高致病性禽流感病毒H5N1 HADNA疫苗与全病毒灭活疫苗诱导产生的母抗对母鼠及子鼠的保护效果。实验结果表明:母鼠接种H5N1 HADNA与母鼠接种全病毒灭活疫苗一样,都能保护母鼠及胎儿抗流感病毒的感染,高滴度抗体主要通过乳汁喂养方式传递到子代;母鼠接种HADNA疫苗或灭活疫苗2次后诱导产生的母源性抗体都能保护所产1-4周龄的子鼠抵御致死量流感病毒攻击;乳汁喂养传递的抗体能保护1-4周龄的幼龄子鼠抵御致死量流感病毒攻击;胎盘传递抗体只能部分保护1-2周龄子鼠抵御致死量流感病毒攻击。不论母鼠接种HADNA疫苗还是灭活疫苗经乳汁和胎盘传递到子代的抗体都是IgG2a高于IgG1。母体接种HADNA疫苗可能成为快速有效地保护子代出生早期抗流感病毒感染的另一个重要策略。三)探讨了不同免疫途径在克服母源性抗体干扰中的作用。以BALB/c小鼠为动物模型,在高致病性禽流感H5N1全病毒灭活疫苗诱导的母源性抗体存在的情况下,探讨了子鼠以肌肉、腹腔、皮下、粘膜等不同免疫途径接种灭活疫苗后的主动免疫应答的情况,根据初步实验筛选发现尽管高母源性抗体的存在,子鼠以粘膜免疫方式接种疫苗后能抗致死量流感病毒的攻击,这说明粘膜免疫在抗母源性抗体干扰方面有一定作用,因此重点研究了粘膜免疫对母源性抗体的干扰作用。实验结果表明:母鼠与所产子鼠都用腹腔注射方式接种灭活疫苗,母抗严重干扰子鼠的主动免疫应答反应,即使子鼠免疫高剂量(5μg)的疫苗,干扰作用也不能被克服;母鼠腹腔注射灭活疫苗而所产子鼠用粘膜免疫方式接种时,较低剂量(0.1μg)的疫苗不能克服母抗干扰作用,较高剂量(1μg)的疫苗能克服母抗干扰作用;母鼠粘膜方式接种灭活疫苗所产的子鼠也用粘膜免疫方式接种,当子鼠接种较低剂量(0.1μg)的疫苗时不能克服母抗干扰,接种较高剂量(1μg)的疫苗时,干扰作用能被解除;当母鼠用粘膜方式接种而子鼠用腹腔方式接种疫苗时即使子鼠接种高剂量(5μg)的疫苗,母抗对其主动免疫应答的的干扰性也不能被克服。以上实验结果表明不论母体选用何种免疫方式,滴鼻粘膜免疫接种子鼠都能克服母抗对其主动免疫应答的干扰作用。这一实验结果为临床及养殖业子代及时接种疫苗抗流感病毒的感染提供了实验参考。四)探讨了 H5N1 HADNA在克服母源性抗体干扰中的研究。与传统的疫苗相比,DNA疫苗能够在体内长久的表达,因而DNA疫苗可能是解除母源性抗体抑制作用的一种选择,因此本实验中我们选择了 H5N1 HADNA疫苗进行研究,在有高剂量母源性抗体存在的情况下,研究子鼠接种HADNA疫苗后对子鼠主动免疫应答的影响。实验中母鼠采用了 1.0μg与O.10μg两个剂量进行接种,因此所产子鼠体内残留的病毒滴度也不同,此时对子鼠接种相同剂量的30μgH5N1 HADNA疫苗,看HADNA疫苗接种子鼠后能否克服母源性抗体的的干扰。实验结果发现:当母鼠接种0.10μg剂量的灭活疫苗时,子鼠接种HADNA疫苗能够克服母源性抗体的干扰;当子鼠接种1.Oμg剂量的灭活疫苗时,接种HADNA疫苗不能克服母源性抗体的干扰。这说明,HADNA疫苗在克服母抗干扰中有一定的作用,接种疫苗时子鼠体内存在的母源性抗体的量是影响疫苗接种后免疫应答的关键。