【摘 要】
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第一部分Pgant4和Tango1的上调/下调对果蝇缺氧耐受性的影响目的:使用Pgangt4和Tango1突变体果蝇品系,观察Pgangt4下调和Tango1上调/下调对果蝇缺氧后神经元损伤及缺氧耐受性的影响。方法:我们将野生型（WT）、Pgangt4缺失突变体(Pgangt4f02186/f02186)、Tango1下调突变体(Tango1RNAi)和Tango1上调突变体(Tango1OE)四
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第一部分Pgant4和Tango1的上调/下调对果蝇缺氧耐受性的影响目的:使用Pgangt4和Tango1突变体果蝇品系,观察Pgangt4下调和Tango1上调/下调对果蝇缺氧后神经元损伤及缺氧耐受性的影响。方法:我们将野生型（WT）、Pgangt4缺失突变体(Pgangt4f02186/f02186)、Tango1下调突变体(Tango1RNAi)和Tango1上调突变体(Tango1OE)四种基因型果蝇进行缺氧3h处理,之后连续五天统计每天各基因型果蝇累计死亡率,绘制生存率曲线;另取10-20只四种基因型果蝇分别进行不缺氧和缺氧3h处理,体视镜下解剖出果蝇大脑并进行免疫荧光染色,检测缺氧前后果蝇大脑内凋亡蛋白活性caspase-3水平变化。结果:Pgangt4f02186/f02186和Tango1RNAi突变体果蝇缺氧后连续五天累计死亡率较WT组显著降低,且缺氧后果蝇大脑活性Caspase-3含量增加程度较WT组降低;而Tango1OE突变体果蝇缺氧后累计死亡率较WT组增加,且缺氧后果蝇大脑活性caspase-3含量较WT组增加更明显。结论:下调Pgant4和Tango1表达量可抑制果蝇大脑缺氧后神经元细胞凋亡,提高果蝇缺氧耐受能力;而上调Tango1表达量则可加重缺氧后果蝇大脑损伤,降低果蝇耐缺氧能力。第二部分Pgant4和tango1在缺氧损伤中的相互作用目的:使用Pgant4基因缺失突变体果蝇,检测下调Pgant4对Tango1表达量的影响,探究Pgant4和Tango1在缺氧损伤中的相互作用。方法:我们将野生型果蝇和Pgant4基因缺失突变体果蝇各分为四组,分别进行缺氧0h、1h、3h和缺氧3h-复氧3h处理,后取果蝇头部,用蛋白免疫印记技术检测每组果蝇大脑内Tango1和糖化-Tango1表达情况。结果:野生型果蝇在缺氧3h和缺氧3h-复氧3h处理后,果蝇大脑内Tango1和糖化-Tango1含量较未缺氧组显著增加,而Pgant4基因缺失突变体果蝇缺氧及缺氧-复氧后大脑内Tango1和糖化-Tango1含量增加程度较野生型果蝇降低。结论:缺氧及缺氧-复氧可使果蝇大脑内Tango1和糖化-Tango1含量增加,Pgant4下调可抑制这种现象。
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