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目的：检测淫羊藿甙对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1中Smad4的mRNA影响。 方法：MC3T3-E1细胞分成4组，分别加入0ng／ml、10ng／ml、20ng／ml、40ng／ml的淫羊藿甙。用倒置相差显微镜观察细胞生长情况。通过MTT法测绘细胞生长曲线和计算细胞群体倍增时间；描述MC3T3-E1细胞在不同浓度淫羊藿甙刺激下的增殖能力。用速率分光光度法测定培养1，2，3天后细胞ALP的含量；免疫组织化学法观察培养3天后Ⅰ型胶原的产生，用以判断细胞的分化情况。用RT-PCR半定量测定各组Smad4的mRNA数量。 结果：①在淫羊藿甙刺激下，MC3T3-E1细胞呈多角形，紧密全层排列，胞浆丰富，染色质松散，符合成骨细胞特点；②10ng／ml、20ng／ml组的生长曲线较0ng／ml、40ng／ml组上移；方差分析显示10ng／ml、20ng／ml组MTT OD值较40ng／ml和0ng／ml组有显著性差异(P＜0.01)。0ng／ml、10ng／ml、20ng／ml和40ng／ml组的群体倍增时间分别为：39.37±2.35h、26.7±1.78h、29.3±2.12h和36.35±2.34h，各组间差异具有显著性(P＜0.01)；③培养后第1天各组织之间ALP差异不具有显著性(P＞0.05)，第2天10ng／ml和20ng／ml组的ALP值分别为：129.45±14.54u／L和127.58±9.77u／L；40ng／ml和0ng／ml组的ALP值分别为：92.15±5.77u／L和93.23±8.72u／L。10ng／ml、20ng／ml组较40ng／ml、0ng／ml组的差异具有显著性(P＜0.01)。第3天0ng／ml、10ng／ml、20ng／ml和40ng／ml组的ALP含量分别为229.31±23.46u／l、304.65±12.94 淫羊蓝贰对成骨细胞Smad4作用的实验研究天津医科大学博士学位论文u/1、271.39士15.60u/1和208.75士14.74u/1，各组间差异具有显著性 (尸<0.01):④免疫组织化学结果显示ong/血1、long/ml、Zon留inl和40ng/mlI型胶原显色分别为++，一+，+一，++;⑤RT-PCR显示:ong/ml、1 ong/ml、20ng/ml和4ong/ml组sm以m胭A的on值分别为1 .5 x 104、6.4xlo4、4 .5 x 104和l.3xl04。 结论:①细胞生长曲线的上移和群体倍增时间的缩短提示淫羊蕾昔刺激成骨细胞MC3T3一El增殖;②ALP在培养后第三天明显增高和I型胶原显色增强显示淫羊蕾昔刺激成骨细胞MC3T3一El分化;③淫羊蕾昔可以提高成骨细胞smad4mRNA的量，上述作用以10ng/ml浓度作用最强。