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目的:高迁移率族蛋白B1(HMGB1)作为一种晚期炎症介质,介导了脓毒症和其他系统性炎症的致死性。本试验拟应用大鼠烫伤延迟复苏模型明确HMGB1在严重烫伤中的表达变化规律,进而阐明HMGB1对细胞免疫功能的影响并对其机制进行初步探讨。旨在为烫伤后脓毒症及多器官功能障碍综合征的预防和治疗提供新思路。 方法:采用30%TBSAⅢ度烫伤后延迟6小时复苏大鼠模型。雄性Wistar大鼠103只,随机分为:①正常对照组(n=7),麻醉后活杀;②假烫伤组(n=32),分别在假烫伤后1、3、5、7天后活杀;③烫伤组(n=32),在烫伤后6小时给予林格氏液(40ml/kg)抗休克治疗,此外在烫伤后12、24、36、48小时分别给予3ml/次林格氏液腹腔内注射,在相应时间点活杀;④EP液(3.23mg/ml)治疗组(n=32),于烫伤后6小时EP液(40ml/kg)抗休克治疗,此外在烫伤后12、24、36、48小时分别给予3ml/次EP液腹腔内注射治疗,在相应时间点活杀。无菌取腹主动脉血及脾脏。离心取血浆,应用ELIsA分析血浆中IL-2及sIL-2R含量。脾脏分为两部分:一部分应用RT-PCR检测HMGB1、IL-2、IL-2R基因的表达及应用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)分析活化T-细胞核因子(NFAT)活性。另一部分脾脏用于脾淋巴细胞分离,应用MTT技术分析淋巴细胞增值,应用ELISA分析培养上清中IL-2、IL-4及IFN-γ含量,应用细胞流式技术检测脾淋巴细胞白介素2膜受体(mIL-2R)的表达、细胞周期及淋巴细胞的凋亡。 结果:1.烫伤延迟复苏后HMGB1分泌及mRNA表达规律:(1)与假烫伤组相比,烫伤1、3、5天血浆HMGB1水平显著升高 (P<0.05或P<0.01)。EP治疗组1、3、5天血浆HMGB1显著降低(P<0.05或P<0.01),至烫伤后第7天无统计学差异(P>0.05)。(2)烫伤组1、3天HMGB1的基因表达量明显增加,其中烫伤后第一天升高最为显著(P<0.01)。但应用EP