论文部分内容阅读
目的:1.探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)患者与正常妇女卵泡颗粒细胞(granulosa cell,GC)表达P450芳香化酶(cytochrome P450 aromatase,P450arom)的差异及P450arom在卵泡发育中的表现。2.探讨颗粒细胞卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormonereceptor,FSHR)、黄体生成素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)及P450arom的表达与PCOS卵泡功能的相关性。方法:本实验选取2007年3月至2007年11月期间在我院生殖中心进行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)治疗的PCOS患者(PCOS组)及同期非PCOS原因导致不育的患者(正常对照组)共48例。在取卵日分别收集卵泡直径≥14mm(大卵泡组)及＜14mm(小卵泡组)所有卵泡液,同时分离颗粒细胞,Trizol一步法提取颗粒细胞总RNA,进行光密度(OD)定量分析后,P450arom mRNA(messenger RNA,信使RNA),FSHR mRNA及LHR mRNA分别进行逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR),PCR产物做琼脂糖凝胶电泳后,用凝胶图像分析仪摄片,进行半定量分析。在取卵日收集血清用免疫化学发光法测定其雌二醇(estradiol,E2)及睾酮(testosterone,T)浓度。收集的≥14mm及＜14mm卵泡液,分别用免疫化学发光法测定其E2浓度并用放射免疫分析技术(radioimmunoassay,RIA)测定其雄烯二酮(androstenedione,A)浓度。结果:PCOS组与正常对照组相比较,HCG日B超总卵泡数及获卵数均显著增多,Gn(gonadotropin,促性腺激素)用量显著低于正常对照组。PCOS组血清E2及T水平均明显高于正常对照组,差异十分显著(P＜0.01),PCOS组与正常对照组血清E2/T值相比较则无显著性差异(P＞0.05)。卵泡液激素测定结果显示,PCOS研究组中大卵泡组E2水平明显高于小卵泡组(P＜0.05),而在正常组中大卵泡组与小卵泡组比较E2水平差别无统计学意义,分别比较大小卵泡组中PCOS组与正常对照组E2水平均无明显差别;PCOS组与正常对照组的大卵泡组A水平均低于小卵泡组A水平,且在大卵泡组及小卵泡组中,PCOS两组A水平均高于正常对照两组;E2/A值则与之相反,大卵泡组均高于小卵泡组,PCOS组均低于正常对照组,差异有统计学意义。颗粒细胞P450arom mRNA的表达水平在PCOS组和正常对照组中大卵泡组均高于小卵泡组,且PCOS大小卵泡组均低于正常对照两组,差异有统计学意义;颗粒细胞FSHRmRNA的表达水平仅在PCOS组大卵泡组高于小卵泡组,余差别均无统计学意义;颗粒细胞LHRmRNA的表达水平在PCOS组中大卵泡组高于小卵泡组,在正常组中无差别,PCOS组的LHRmRNA的表达水平大小卵泡组均高于正常对照两组,差异有统计学意义。颗粒细胞P450芳香化酶的表达与E2/A的值显著正相关,PCOS组和正常对照组大小卵泡颗粒细胞表达的FSHR与P450芳香化酶也成正相关关系,PCOS组的LHR表达也与P450芳香化酶有正相关性。结论:1.颗粒细胞P450arom mRNA的表达量随卵泡体积的增大而升高。P450arom的活性随卵泡体积的增大而增强。2.颗粒细胞FSHR及LHR的表达均与P450芳香化酶有一定正相关关系。3.PCOS卵泡颗粒细胞P450arommRNA的表达水平降低,PCOS患者芳香化酶活性不足,较正常女性弱。可能是PCOS发病的一个关键因素,有待进一步证明。