腹膜透析及其并发腹膜炎患者的肠道微生物菌群结构研究

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研究背景:腹膜透析的主要并发症——腹膜炎,严重地影响了其推广和实际疗效。由于肠道细菌移位——细菌透过肠壁直接进入腹腔所导致的感染,是为内源性感染,是机体内部的因素起主导作用,情况复杂。近年来,以慢性肝病患者等为观察对象的研究结果发现:肠道微生态的改变,是促使肠道细菌移位的重要因素。目的:通过对比分析腹膜透析受者、腹膜透析并发腹膜炎患者和健康对照组的肠道微生态组成,明确腹膜透析受者及腹膜透析并发腹膜炎患者的肠道微生物菌群结构及其差异。实验方法:实验分三组,分别为腹膜透析组(PD组,peritoneal dialysis group)14例、腹膜透析并发腹膜炎组(PT组,PD-related peritonitis group)7例和健康对照组(Con组,health control group)7例,提取三组个体的粪便菌群总基因组DNA, PCR扩增16S rRNA基因V3区,运用微生物谱学方法-变性胶梯度凝胶电泳(DGGE)和多变量分析(Multivariate data analysis),同时对各组中的优势菌和不同组的特异菌进行割胶鉴定。结果:UPGAMA聚类分析图显示,同组样本个体之间的相似度均不高,两两小组之间相似度有较为明显的差异。基于PD组、PT组和Con组的肠道菌群DGGE谱的最小二乘法-判别分析(PLS-DA分析)发现:三组间的肠道菌群组成可以分别明显分开,Con组与PD组和PT组的肠道菌群存在明显差异;并且PT组与Con组的肠道菌群差异最为显著。对PT组中出现的特征性条带测序鉴定后发现这些菌与Acidaminococcus菌属亲缘关系最近。结论:腹膜透析受者、腹膜透析并发腹膜炎患者及健康对照个体(两两之间)具有不同粪便微生物群落多样性(菌群结构、优势菌群),腹膜透析本身及腹膜炎均可能对肠道微生物的多样性产生影响。
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