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Toll样受体(Toll-likereceptors,TLRs)是一类可以识别病原体相关分子模式(pathogen associated molecule patterns,PAMPs),结构中拥有富含亮氨酸重复序列胞外域的I型跨膜蛋白。它可以激活下游炎症通路,诱导机体免疫系统分泌相应细胞因子,以清除或抵御相应的病原微生物。小尾寒羊乳房炎的发生,一直是阻碍养羊业发展的重要原因,如何利用TLR在天然免疫中的重要作用,预防和治疗细菌性乳房炎成为新的研究热点。为研究TLRs在大肠杆菌(Escherichia coli)侵入小尾寒羊(Ovis aries)乳腺组织后在小尾寒羊外周血白细胞和乳腺组织中的表达情况,实验采用人工感染大肠杆菌(O113型),采用qRT-PCR检测大肠杆菌感染乳腺组织12h、24h、36h、48h、72h后,血液和乳腺组织中TLRs基因的相对表达量;利用Western-blot方法对乳腺组织感染大肠杆菌后不同时间段内TLRs蛋白的相对表达量进行研究。结果显示,在大肠杆菌侵入小尾寒羊乳腺后,在小尾寒羊外周血白细胞中,除TLR8外,TLR1~10均有表达,其中在大肠杆菌感染24h后小尾寒羊外周血白细胞中TLR2、3、4、5mRNA均出现显著或极显著升高;感染36h后TLR2、3、4、5、6、7mRNA均出现显著或极显著升高;48h后TLR2、4、5mRNA均出现显著或极显著升高。在小尾寒羊乳腺组织中结果显示TLR1、TLR2、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR10的相对表达量在感染大肠杆菌后均有所升高,其中在12h时TLR1、4、6出现显著升高;24h时TLR2、4出现显著或极显著升高;36h时TLR1、2、4出现显著或极显著升高;48h时TLR1、2、4、6出现显著或极显著升高;72h时TLR2、4、7、10出现显著或极显著升高。各处理组与对照组相比TLRs蛋白表达随感染时间的延长而上调,在感染36h时均出现显著或极显著升高。该结果提示在大肠杆菌刺激后可以明显提高TLRs在小尾寒羊外周血白细胞和乳腺组织中的相对表达量,具有时间依赖性,研究表明小尾寒羊多种TLRs都参与了机体对病原体的识别,为进一步研究不同TLRs在炎症发病过程中的作用机制提供了数据支持和基础资料。