论文部分内容阅读
背景与目的缺血性心脏病(ischemic heart disease, IHD)是严重威胁老年人群健康的疾病。衰老的机体在心肌缺血情况下,普遍存在血管新生障碍,表现为血管新生能力减弱、密度降低和侧枝循环减少等。心肌血管新生可能是治疗老年患者缺血性心脏病的新途径,但其发生和发展的分子生物学机制尚不明确。有研究表明,生长停滞特异性蛋白6(Gas6)能促进肿瘤血管新生和成熟。我们的研究提示,Gas6是缺血性心脏病的保护因子。该保护作用是否与Gas6促进心肌缺血区血管新生和成熟有关,尚无相关报道。本研究旨在探索以下问题：1.Gas6蛋白是否具有促进血管新生的作用；2.Gas6蛋白促进血管新生的作用机制；3.在人体内抑制血管新生是否导致缺血性心脏病的发生。方法1.建立来源于人脐带血的内皮祖细胞模型,给予不同浓度的Gas6蛋白干预(25,50,100和200ng/ml)。运用MTT法、Transwell小室迁移和小管形成实验,分别检测细胞增殖、迁移和成管能力。2.在人内皮祖细胞模型中,给予不同浓度的Gas6蛋白干预(25,50,100和200ng/ml)。并运用P13K抑制剂(LY294002)和ERK的抑制剂(PD98059)进行干预,运用Western blot检测反映EPC增殖功能的MAP和Akt的磷酸化状态；分析对EPC增殖和迁移的影响。3.在PubMed, EMBASE and Web of Science数据库,检索2012.10月之前发表的所有文献。选择有血管内皮生长因子抗体(贝伐单抗)与对照组治疗肿瘤患者的临床研究进行系统评价,明确血管新生障碍导致患者缺血性心脏病发生的情况。分析来自7个随机对照研究的4,617例患者数据,基于异质性检验的结果运用随机效应模型或固定效应模型,计算所有纳入研究的总缺血性心脏病发生率,相对风险(relative risks, RRs)和95%置信区间(confidence intervals, CIs)。结果1.Gas6蛋白增强了内皮祖细胞的增殖和迁移能力,并具有剂量依赖性。但是,Gas6蛋白对内皮祖细胞成管未见直接促进作用。2.Gas6蛋白上调Akt磷酸化的水平,但不上调ERK磷酸化的水平。Gas6蛋白并不促进EPC细胞成管。抑制P13K会显著减少Gas6诱导的内皮祖细胞增殖和迁移,但是抑制ERK并不减少Gas6导致的增殖和迁移。3.给予血管新生抑制剂治疗的肿瘤患者,缺血性心脏病的发生率是1.0%(95%CI,0.6%-1.4%)。与对照组相比,血管新生抑制剂治疗的肿瘤患者发生缺血性心脏病的风险显著增高(RR=2.49,95%CI：1.37-4.52)。且无论是低剂量(每周2.5mg/kg)还是高剂量(每周5mg/kg)给药,均有缺血性心脏病的风险。(RR分别为2.14,95%CI：1.09-4.19；4.81,95%CI：1.03-22.42)。其中,对于结直肠癌的患者,血管新生抑制剂导致的缺血性心脏病风险比为2.13(95%CI：1.11-4.06)。结论1.Gas6蛋白增强内皮祖细胞的增殖和迁移功能,但不直接增强成管作用。2.Gas6蛋白通过激活AKT信号通路增强了内皮祖细胞的增殖和迁移功能。3.血管新生抑制剂会增加结直肠癌患者缺血性心脏病的发病风险。