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目的：信号转导与转录激活因子(STATs)在细胞生长、增殖、凋亡、分化等方面发挥重要作用。在肿瘤细胞系及原发性肿瘤(包括血液恶性肿瘤和实体瘤)中均发现组成型激活的STATs。尽管CD4+CD25+regulatory T cell(Treg)细胞通过抑制宿主对自身和外来抗原的免疫反应诱导免疫耐受，从而在抑制自身免疫性疾病中发挥重要作用。但它们也因此而抑制抗肿瘤免疫并促进肿瘤生长。前期实验结果显示沉默肿瘤细胞STAT4前后，其培养上清液对CD4+CD25+Foxp3+regulatory T cell(Treg)细胞的诱导效应存在差异。在体外细胞实验中进一步比对沉默STAT4前后细胞分泌蛋白及总蛋白的差异，从而得到沉默STAT4后对细胞蛋白质表达谱的影响，并为最终发现体外诱导CD4+CD25+Foxp3+Treg的新蛋白奠定基础。
方法：应用RT-PCR的方法从mRNA水平；Western blot的方法从蛋白质水平筛选不同肿瘤细胞系从而找到高表达STAT4基因的细胞株，采用RNAi的方法沉默该基因，并应用Realtime PCR的方法检测沉默率。采用Realtime PCR的方法检测沉默STAT4基因后对小鼠淋巴瘤细胞分泌IL-2、TGF-β和IL-10的影响，以SELDI-TOF MS法检测肿瘤细胞培养上清液中的蛋白质变化，并进一步用二维电泳的方法分析沉默STAT4后肿瘤细胞蛋白质组的变化。
结果：应用RT-PCR和western方法筛选到T细胞来源小鼠淋巴瘤细胞系EL-4高表达STAT4基因；通过Realtime PCR分析，沉默STAT4基因后，肿瘤细胞IL-2、TGF-β和IL-10的表达量在mRNA水平没有改变。SELDI-TOF MS结果显示沉默STAT4后，肿瘤细胞培养上清液中蛋白质在质荷比(M/Z)为3120、3259、3404、3606、5096、6082、8590、12335、13578处差异明显。细胞总蛋白二维电泳结果显示20个蛋白表达量明显改变。
结论：沉默STAT4基因后，EL-4细胞蛋白表达谱发生改变，有20个蛋白质点的改变具有统计学意义。细胞分泌蛋白发生改变。这些改变的蛋白质中可能包含了可体外诱导CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的蛋白。