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本文对小菜蛾脑组织转录组进行了测定及分析,明确了幼虫期脑组织中基因的组成和种类以及它们在菜蛾盘绒茧蜂寄生后的数字表达谱,从中鉴定出一批脑神经肽基因,并用qrt-PCR的方法检测和比较了他们在寄生和未寄生小菜蛾脑组织中的表达模式。现将结果总结如下:1.小菜蛾脑组织转录组测序及功能注释使用Illumina测序技术对小菜蛾脑组织转录组进行测序,共得到7,115,762个reads,总长度为1,280,837,160个核苷酸,reads平均读长为180bp。Reads通过系列拼接得到42,441个unigene序列。E值的阈值为1.0E-5时有19,144个unigene在Nr有序列相匹配。可注释序列中85.5%的比对结果E值在1.0E-50到1.0E-5之间;相似度的分析发现34.6%的序列与比对上序列的相似度大于60%。比对时排第一的序列进行物种分析发现,比例最大的是意大利蜜蜂26.3%,同为鳞翅目的家蚕占5.79%。2.神经肽基因的鉴定根据Nr功能注释结果,发现转录组数据中有19种已知的神经肽基因EST序列,它们是:Allatostatin A(AstA), Allatostatin C (AstC), Allatotropin (AT), Allatotropin (AT)、Bursicon (BUR)、Partner of Bursicon (PBUR)、CCHamide、 CHH-like protein precursor、Crustacean cardioactive peptide (CCAP)、Diuretic hormone isoform DH45precursor、FMRFamide、FMRFamide-related peptides (FaRPs)、Ion-transport peptide、precursor-like protein (ITP)、Leucokinin (LK)、 Neuroparsin、Neuropeptide F2(NPF2)、Neuropeptide-like precursor1(NPLP1)、 Prothoracicotropic hormone precursor (PTTH)、Short neuropeptide F (sNPF)、 Tachykinin (TK)、Tachykinin (TK)。通过反转录PCR验证了其中6个神经肽基因的存在,即:A型咽侧体抑制肽AstA,咽侧体活化肽AT,鞣化激素BUR及PBUR,促前胸腺激素PTTH和类甲壳心律肽CCAP。3.小菜蛾脑组织数字基因表达谱测序本论文共测了小菜蛾3龄中、3龄末及被菜蛾盘绒茧蜂寄生后12、24、48、72、120、168小时等不同发育时期脑组织的数字基因表达谱,发现寄生24小时与3龄末相比上调基因有1974个,下调基因有1749个,但神经肽同源序列没有显著变化;差异表达基因中有517个可以匹配到GO功能聚类中,其中下调基因有433个。4.神经肽转录水平表达模式分析通过实时定量PCR方法对6个已验证的神经肽基因的表达模式及寄生的影响进行了分析。研究发现,所有6个神经肽基因总体上在3龄末有一个表达高峰,4龄和蛹初期基本处在较低点,蛹末期相对表达量回升。被菜蛾盘绒茧蜂寄生后,6个神经肽基因在3龄末的表达高峰均被抑制,且表达量基本保持与未寄生时相当的水平。