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目的:探讨氯化锂对鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型保护作用及其可能的机制。 方法:实验分溶剂对照组、鱼藤酮模型组、阳性对照组和实验组。鱼藤酮模型组以500nM的鱼藤酮处理细胞24h,建立多巴胺能细胞损伤模型;阳性对照组以终浓度为0.2μM的雷帕霉素预处理SH-SY5Y细胞24h后,加入鱼藤酮处理24h;溶剂对照组不加鱼藤酮及预处理药物,仅以相同体积的溶剂二甲基亚砜(DMSO)处理SH-SY5Y细胞24h。实验组分别以终浓度为10mM的Licl、10mMLicl+10mM自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)、10mMLicl+10μM自噬抑制剂氯喹(Chloroquine,CHL)、10mM3-MA、10μMCHL预处理SH-SY5Y细胞24h后,加入鱼藤酮处理24h。显微镜下观察各组细胞形态,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率(AnnexinV-FITC/PI)、细胞内活性氧水平(DCFH-DA),荧光显微镜下观察线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotentia,MMP)变化及线粒体与LC-3的共定位,Western免疫印记法检测各实验组LC-3Ⅱ表达量及LC-3?LCⅡ-3Ⅰ蛋白的表达。 结果:500nM鱼藤酮处理SH-SY5Y细胞24h能够诱导细胞活性下降和细胞凋亡。与自噬激活剂雷帕霉素相同,氯化锂预处理能显著提高鱼藤酮诱导损伤的SH-SY5Y细胞存活率(P<0.05),减轻细胞凋亡率(P<0.05),降低细胞内活性氧水平(P<0.05),缓解线粒体膜电位的下降,上调自噬水平(P<0.05),促进自噬对线粒体的清除;而在自噬抑制剂3-MA、CHl组,作用则相反;氯化锂联合自噬抑制剂组,其上述作用均有不同程度减弱。 结论:氯化锂预处理可缓解鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤,这种保护作用可能是通过上调自噬,促进线粒体自噬途径的降解,减少活性氧的产生,维持膜电位水平等机制实现的。