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目的:随着当今社会的发展,战争的阴影始终威胁着人类的生存,特别是大规模杀伤性武器如化学武器、生物武器、核武器等。神经性毒剂和常见的有机磷农药均属于有机磷类毒剂,毒性很强并且使用率极高。它们可以快速的通过皮肤、粘膜、胃肠道等途径,使人体吸收并引起全身中毒,从而诱发多器官衰竭而死亡。抗胆碱能药物用于神经性毒剂中毒的急救和对症治疗,而最根本的药物干预方法是在最短时间内使毒剂分子与乙酰胆碱酯酶(AChE)分离,恢复AChE水解乙酰胆碱(ACh)的功能。在有机磷(OP)化合物中毒的标准治疗中,包括作为AChE重新激活解毒剂肟类药物的使用。然而,体内血脑屏障的存在使得这些药物无法高效递送至中枢神经系统。酰胺磷定(HI-6)是一种广泛使用的重活化剂,由于其具有亲水性,难以透过BBB。因此,本研究希望通过递药系统将重活化作用较好的HI-6大量透过BBB,在中枢迅速释放,活化被抑制的AChE。方法:本研究拟采用界面聚合法制备c(RGDyK)环肽偶联的HI-6纳米粒。运用具有可生物降解性且毒性较小的材料聚氰基丙烯酸丁酯(PBCA),使治疗的安全性得到保证。利用材料Pluronic P85作为载体,因其具有抑制P糖蛋白外排、提高药物溶解度等优点。以主药(HI-6)投药量、载体材料氰基丙烯酸正丁酯(α-BCA)用量、Pluronic P85用量作为考察纳米粒优化指标的三因素。通过综合考察HI-6纳米粒的包封率、载药量和粒径的归一化值(OD),采用星点设计-效应面法优化处方及制备工艺。通过透析法测定载HI-6纳米粒的包封率和载药量,并通过激光粒度分析仪进行纳米粒表征。本研究还将原代培养大鼠脑星型胶质细胞(AS)和脑内皮细胞(BCECs),建立双层细胞非接触式体外BBB模型并对其进行评价;运用体外模型考察游离HI-6及各纳米粒的渗透效率;采用CCK-8法考察游离HI-6及各纳米粒对脑毛细血管内皮细胞的毒性;通过激光共聚焦显微镜定性观察BCECs对各种荧光标记纳米粒的摄取情况;通过活体成像法追踪荧光染料标记的纳米粒在小鼠体内的分布;采用ELLMAN法测定小鼠全血和脑酶重活化率。考察不同纳米粒的体内外靶向性。结果:本研究首次将Pluronic P85和c(RGDyK)环肽成功连接,运用界面聚合法制备出c(RGDyK)修饰的中枢靶向Pluronic-PBCA纳米粒。经处方优化后,所制得的HI-6纳米粒平均包封率为63.69%,平均载药量为6.2%,平均粒径为147.7 nm(PDI=0.32),Zeta电位为-7.12 mV,形态为圆形,且分布均匀。我们成功建立了双层细胞体外BBB模型,建立的BBB模型TTER值达183Ω,符合模型要求。c(RGDyK)修饰的纳米粒与非修饰纳米粒相比,渗透脑内皮细胞效果更好。游离HI-6及其纳米粒对内皮细胞毒性低,c(RGDyK)修饰的纳米粒经共聚焦显微镜观察荧光强度高,表明内皮细胞对经修饰的纳米粒比未修饰的纳米粒摄取更明显。体外活体成像实验说明以c(RGDyK)修饰后的纳米粒在小鼠体内更容易达到脑部实现中枢靶向。通过对染鼠中枢和脑酶重活化率计算,得知以c(RGDyK)修饰的纳米粒对于脑部的靶向效果比非修饰的更强。结论:体内外实验证明,c(RGDyK)环肽修饰的纳米粒对于脑部的靶向效果比非修饰纳米粒更强。此外,重活化作用评价显示,修饰的纳米粒对于中毒小鼠的重活化率更高,能体现出用环肽修饰的纳米粒更具有中枢靶向性。本研究的成功实施有望提高神经性毒剂的救治水平。