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本文拟研究日粮添加有机铬对处于不同温热环境的奶牛生产性能、脂质代谢、抗氧化能力和免疫应答的作用,并初步探索奶牛外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)增殖反应与体外高温诱导PBMC凋亡的条件,为奶牛热应激的防控和铬的添加应用提供理论基础。本研究根据温湿度指数(temperature and humidity index, THI),将整个试验期分为低热(THI=56.4士2.5)、中热(THI=73.9士1.7)和高热(THI=80.3士1.0)三个阶段,试验期60d。选取24头临床健康、泌乳中期的初产荷斯坦奶牛作为试验动物,饲喂相同基础日粮。随机选取其中12头奶牛的基础日粮中添加吡啶羧酸铬(铬添加量为3.5mg/头·d)。中、高热分别导致试验奶牛处于轻、中度热应激状态。在生产性能方面,各试验期和铬添加均未显著改变奶牛干物质采食量和产奶量。热应激导致高体细胞数的奶牛数量增多。热应激奶牛白细胞数和血糖水平显著降低,血清尿素氮和肌酐水平显著升高,而胆固醇、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰基转移酶水平无显著变化。结果表明,热应激抑制了奶牛免疫反应,肝脏功能没有因热应激而发生显著变化。热应激奶牛血清超氧化物岐化酶活性升高和丙二醛浓度降低,而总抗氧化能力没有显著变化,提示热应激奶牛可能首先通过增强抗氧化酶活性来减弱氧化应激程度,维持机体总抗氧化能力。热应激奶牛血清丙二醛浓度较低,说明高热没有引起氧化应激的发展,提示高温诱导的氧化应激的发展可能与热应激程度和抗氧化防御机制的效率有关。高热环境下血清TNF-a (tumor necrosis factor-a)和IL-10(interleukin-10)浓度显著升高,提示热应激导致的奶牛炎症反应可能不是氧化应激的结果。Western blot分析表明,热应激没有显著改变PBMC中Hsp72(heat shock protein72)的表达,而高体细胞数奶牛的乳体细胞Hsp72的表达量显著高于低体细胞数奶牛,推测乳体细胞增加的Hsp72表达量主要由乳腺上皮细胞产生。铬添加导致热应激奶牛总胆固醇水平降低和血清Hsp72、IL-10水平升高,同时导致热应激奶牛PBMC中核转录因子抑制蛋白α表达量增加。提示铬调控热应激奶牛的脂质代谢,并表现出一定的抗炎效用。本研究还确定了测定奶牛PBMC增殖反应的最优条件,并用流式细胞分析法初步探索了体外高温(400C)诱导奶牛PBMC凋亡的变化规律,为深入研究高温诱导PBMC凋亡机制提供参考。综上所述,处于夏季热环境的泌乳奶牛炎性反应不是由氧化应激导致的,铬添加调控了热应激奶牛脂质代谢,并发挥一定的抗炎效用,其机制可能是通过促进Hsp72的胞外释放,抑制核转录因子抑制因子α的降解,调控促炎性因子的产生。