论文部分内容阅读
胃癌是我国常见的消化系统恶性肿瘤,其发病率和死亡率在各大恶性肿瘤中均居前列。如何有效的预测胃癌患者预后及治疗效果,是胃癌目前诊疗面临的主要问题。核糖核苷酸还原酶(RNR)是将核糖核苷酸转化为脱氧核糖核苷酸的唯-酶,在细胞DNA合成及修复中具有重要的作用,也是肿瘤治疗的重要靶点之一RRM1是组成RNR的唯一调节大亚基,在肺癌和胰腺癌中被认为与吉西他滨化疗耐药相关,在进展期患者中预示不良预后；而也有研究显示在早期肺癌患者中,RRM1提示良好的预后。在胃癌的研究中,尚无关于RRM1的作用及机制的报道。本文对RRM1在胃癌诊治中的作用和分子机制进行了研究。首先,我们通过免疫组化染色方法研究了RRM1表达在希望城医学中心(COH)和浙江大学(ZJU)两个中心胃癌患者中的作用。我们发现RRM1与淋巴结转移、肿瘤大小、Ki67表达水平和肿瘤分化水平密切相关,Kaplan-Meier生存分析提示RRM1高表达的胃癌患者生存较低表达患者明显降低,多因素Cox风险模型分析则提示RRMl是胃癌患者不良预后的风险因素,风险比分别为2.55(COH,95%CI1.27-5.15)和1.51(ZJU,95%CI1.07-2.13),进一步的分层分析则显示RRM1对进展期、低分化水平和高生长能力的胃癌患者具有更好的预测作用。然后,我们在胃癌细胞模型中对RRM1对胃癌细胞的生长与转移的影响及分子机制进行了分析,发现RRM1主要通过Ras/Raf/MAPK通路显著的影响了胃癌细胞的生长与侵袭,并且与EMT通路也有一定的关联。通过siRNA靶向抑制RRM1表达之后,胃癌细胞dNTP池水平明显下降,MMP-9分泌水平、生长能力和侵袭能力随之明显降低,提示RRM1可能是胃癌治疗的潜在靶点。最后,本研究还对RRMl在早期胃癌治疗中的应用价值进行了深入分析,发现在II期胃癌患者中,高表达RRM1的患者接受5-Fu化疗生存获益显著高于低表达者(p<0.01),而5-Fu相关代谢基因TS、dUTPase也提示相类似的结果。因此,我们以5年生存率为判定终点,对RRMl与相关基因进行计算机建模,得到了对部分根治性术后胃癌(Ⅰb,Ⅱ,Ⅲ期,N=198)患者5-Fu化疗生存预测的诊断模型,可较为有效的预测患者5-Fu化疗的生存获益情况,有助于临床医师做出治疗决策。