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研究目的:通过动物实验,探讨骨骼肌神经肌肉接头(NMJ)在成长期(离乳—性成熟)的形态、结构及发育诱导因子的变化特征,了解哺乳动物NMJ的发育规律及运动干预的影响,为在成长期更好地发展骨骼肌功能提供理论依据。研究方法:出生后3周龄SD雄性大鼠随机分为对照组(C组)、运动组(T组)和悬吊组(H组),T组和H组分别进行运动增强(跑台运动)和运动减弱(尾部悬吊)干预,分别于3、4、5、6、8周龄取腓肠肌,通过冰冻切片、酶和荧光组织化学染色及图像分析、ELISA、RT-PCR等方法,测定NMJ形态、结构、神经源性诱导因子及其受体、肌源性神经营养因子及其受体的表达,并对选定指标进行相关和聚类分析。研究结果:1、成长期大鼠腓肠肌NMJ形态在出生后3-4周和5-8周各有1次显著增长;出生后4-5周NMJ数量显著减少;跑台运动可以促进NMJ形态发育的进程和程度,悬吊则相反,但不影响NMJ数量。2、NMJ结构成分γ-、ε-和δ-nAchR三种亚基的表达在出生后3-5周显著减少,之后仅微量表达;AchE含量在出生后4-5周显著增多,之后保持稳定;跑台运动可以促进γ-nAchR(胚胎型)的减少,悬吊则相反,但对ε-和δ-nAchR(成熟型)的表达及AchE含量无影响。3、神经源性诱导因子Agrin及其受体Musk的表达与NMJ发育的时间规律一致;跑台运动可以促进其表达,悬吊则相反。4、肌源性神经营养因子NT-3及其受体TrkC、BDNF及其受体TrkB的表达与NMJ发育的时间规律一致;跑台运动可以在出生后3-5周促进BDNF的表达,悬吊则相反;运动干预对NT-3无显著影响。5、相关和聚类分析显示,Agrin、NT-3、BDNF与NMJ形态、结构特别是γ-nAchR(胚胎型)减少有关;Musk与突触消除、ε-和δ-nAchR(成熟型)的表达有关;NT-4不具有以上相关性。研究结论:1、成长期大鼠腓肠肌NMJ发育具有双峰(离乳后和青春期)特征的时间规律;NMJ突触消退和向成熟转化主要在出生后3-5周内完成,Agrin、Musk、NT-3和BDNF是这一阶段重要的诱导因子;NT-4主要调控5周龄后的NMJ功能;2、运动可以在一定程度上影响NMJ发育的进程和程度,这可能是通过影响Agrin、Musk和BDNF等因子的表达来实现。