脂多糖及铜离子胁迫下厚壳贻贝补体C3分子表达研究

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补体系统作为一个重要的人体先天免疫系统,在防御宿主病原体方面,发挥着不可替代的功能。补体C3是补体系统中最关键的分子,其作用主要体现在免疫调节,免疫防疫以及免疫病理学方面。补体C3分子在一些无脊椎动物中已被发现,但在双壳类的研究还有待进一步的探索。厚壳贻贝(Mytilus coruscus)被视为中国最重要的经济类贻贝物种之一,广泛分布于黄海,朝鲜半岛及日本北海道水域。近年来,厚壳贻贝正在遭受由各种环境变化引起的疾病危害,其中包括各种生物压力(细菌和病毒)和非生物类压力(热休克或冷休克,高渗压力,食物缺乏,氧含量降低,重金属浓度,有机或无机类化学物质),这种种因素最终导致厚壳贻贝严重的经济损失。基于当前厚壳贻贝的养殖背景,本文通过克隆厚壳贻贝补体C3 MC-C3基因c DNA全长及脂多糖刺激下,铜离子胁迫下厚壳贻贝组织内补体C3 MC-C3表达情况分析,旨在填补补体C3基因在厚壳贻贝中的研究空白,同时为厚壳贻贝面对细菌感染及海洋污染现状对养殖技术的改进等方面提供应用型的指导。具体研究成果如下:本文采用RACE技术,首次获得了厚壳贻贝MC-C3基因c DNA全长,并对其功能域,生物学信息,组织表达分布,脂多糖刺激下及重金属铜离子胁迫下的分子模式表达展开了具体的分析。结果显示:MC-C3基因与其它物种C3分子及补体分子享有高度相似的同源性,其中包括A2MN2,ANATO,A2M,A2Mcomp,A2Mrecep,C345C功能域,C3转化酶裂解位点,硫脂基序以及保守的半胱氨酸,组氨酸和谷氨酸残基。MC-C3在厚壳贻贝七种组织中均有相对表达,其中腮的表达量最高。在铜离子和脂多糖的刺激下,前期的MC-C3分子均呈现出正相关的趋势,随着刺激时间的增加,又慢慢恢复到正常水平。这些结果表明,厚壳贻贝MC-C3会在外来刺激下,作出应激反应,说明这种补体分子可以作为一种模式识别分子,在贻贝的先天免疫方面发挥作用,同时可以为贻贝的繁殖育苗提供技术性指导。
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