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[背景]口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是口腔黏膜的慢性浅表性炎症性角化异常性疾病,皮肤和黏膜可单独或同时发病,女性多于男性,属于癌前病变,其癌变率为0.4%-12.3%。口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是口腔中最常见的恶性肿瘤,OSCC是上皮源性肿瘤,上皮源性肿瘤的发生大多数经历一个“正常细胞→癌前病变→癌”的动态过程。这个过程是受基因控制的。每一种ras基因都分别编码一种高度同源的鸟苷酸结合蛋白,分子量为21kb,故称P21蛋白。ras癌基因族主要包括三种癌基因:H-ras,K-ras和N-ras,它们具有相似的结构。ras基因是人体细胞最容易发生突变基因之一,ras原癌基因在口腔癌的发生中占有重要的地位。肿瘤形态学发生明显改变前已有ras癌基因的活化和突变。survivin基因是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,UP)家族的新成员,其高表达促使肿瘤细胞增殖、逃避凋亡,参与了细胞的有丝分裂过程,具有抑制细胞凋亡和调节细胞增殖的双重作用。在胚胎组织中表达,在成熟的终末分化组织中不表达。而在人类大多数恶性肿瘤中高表达。P16蛋白是一种周期蛋白依赖性激酶抑制因子(cyclin dependent kinase inhibitors,CDK-inhibitors),P16基因的异常与多种肿瘤的发生有关。P21蛋白、survivin蛋白及P16蛋白在口腔癌前病变和口腔鳞状细胞癌中表达关系的研究国内外少见报道,它们在口腔肿瘤发生发展中的可能作用还不清楚。[目的]采用免疫组化方法检测P21、survivin、P16蛋白在正常口腔黏膜,口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌中的表达水平。以探讨P21、survivin、P16基因在正常口腔黏膜,口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌中的表达及意义,为OLP癌变潜能检测提供理论依据。[材料和方法]所有标本均选自郑州大学第一附院病理科1998～2007年存档的蜡块和口腔科活检或手术切取的组织(经10%福尔马林固定,石蜡包埋)。选取26例口腔正常粘膜(均取自门诊黏液腺囊肿切除的边缘黏膜组织),40例糜烂型口腔扁平苔藓,40例口腔鳞状细胞癌,其中Ⅰ级13例,Ⅱ级14例,Ⅲ级13例,其中3例口腔扁平苔藓癌变。26例口腔正常粘膜作为对照组。采用免疫组化技术对所有标本进行P21、survivin及P16蛋白染色,对阳性细胞进行计数,计算其阳性表达率,最后对各组数据进行统计学分析,计数资料用秩和检验,相关性分析采用spearman’s分析,取α=0.05作为检验水准。[结果]1.P21在正常口腔黏膜中阳性表达率为13.04%(3/26),糜烂型OLP其阳性表达率为35.00%(14/40),在口腔鳞状细胞癌中阳性表达率为60.00%(24/40)。鳞癌组与正常对照组相比,阳性细胞计数差异有统计学意义(P＜0.05);糜烂型口腔扁平苔藓组与正常对照组相比,阳性细胞计数差异有统计学意义(P＜0.05);鳞癌Ⅰ、Ⅱ级组与糜烂型口腔扁平苔藓组相比,阳性细胞计数差异均有统计学意义(P＜0.05)。但鳞癌Ⅲ级组与糜烂型口腔扁平苔藓组相比,差异无统计学意义(P＞0.05)。提示P21蛋白在OLP向OSCC转变过程中起重要作用,且与OSCC的分期及预后有关。2.survivin蛋白在正常口腔黏膜中极低表达,占3.8%(1/26),糜烂型OLP组织中survivin蛋白阳性表达率30%(12/40),两组之间差异具有明显统计学意义(P＜0.05)。OSCC组织中22例(其中鳞癌Ⅰ级5例,鳞癌Ⅱ级10例,鳞癌Ⅲ级7例)survivin蛋白阳性表达率55%(22/40)。survivin蛋白在正常口腔黏膜组织与OSCC组织中的表达差异均有显著性(P＜0.05),糜烂型OLP与鳞癌相比,阳性细胞计数差异有显著性(P＜0.05)。但鳞癌Ⅰ级与糜烂型OLP相比,差异无统计学意义(P＞0.05)。鳞癌Ⅱ级与糜烂型OLP相比,差异有统计学意义(P＜0.05)。鳞癌Ⅲ级与糜烂型OLP相比,差异有统计学意义(P＜0.05)。以上研究结果提示:survivin在OLP和OSCC发生发展过程中起重要作用,但在糜烂型OLP向OSCC转变过程中可能不作为主要因素。3.P16在正常口腔黏膜,糜烂型OLP及OSCC中的表达:P16蛋白在正常口腔黏膜中22例表达率为84.62%(22/26),糜烂型OLP组织中21例P16蛋白阳性表达率52.50%(21/40),OSCC组织中P16蛋白阳性表达率22.50%(9/40)。P16蛋白在正常口腔黏膜组织与OSCC组织中的表达和糜烂型OLP组织中的表达差异均有显著性(P＜0.05)。在正常口腔黏膜、OLP和OSCC中P16蛋白表达强度具有递减的趋势。提示:P16蛋白的低表达,可能是肿瘤发生的原因之一。[结论]1.P21蛋白在OLP及OSCC中的表达呈增高趋势,表明P21蛋白可能是口腔黏膜癌变的早期事件,可作为癌变检测的一个重要指标。2.survivin在正常口腔黏膜、糜烂型OLP及OSCC中阳性率随组织异常程度增加而升高,表明OLP及OSCC的发生发展和向OSCC发展中起重要作用。3.P16蛋白表达随组织异常程度的增加而减少,对口腔黏膜癌前病变的恶性转化起重要作用。4.口腔鳞癌的形成与P21蛋白的增高和survivin蛋白的增高呈密切正相关性。5.口腔黏膜癌变的发生发展过程中,随着P21蛋白的增高,P16蛋白呈逐渐降低趋势,二者呈明显相关性。6.从正常口腔黏膜、OLP到OSCC的演变过程中,survivin蛋白表达增强,与P16蛋白低表达存在着明显的负相关性。